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蛋白質的理化性質

2010-12-05 09:50  來源:醫(yī)學教育網    打印 | 收藏 |
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  (一)蛋白質的變性作用

  1.概念:在某些理化因素作用下,蛋白質嚴密的空間構象(次級鍵特別是氫鍵)破壞,導致若干理化性質和生物學性質的改變稱為變性。

  2.變性的本質:破壞非共價鍵和二硫鍵,不改變蛋白質的一級結構。

  3.蛋白質變性后的表現:①生物活性喪失;②理化性質改變(溶解度降低、粘度增加、結晶能力消失、易被蛋白酶水解);

 、圩冃缘牡鞍踪|易于沉淀,有時蛋白質發(fā)生沉淀,但并不變性。

  4.復性:變性的蛋白質,只要其一級結構仍完好,可在一定條件下恢復其空間結構,隨之理化性質和生物學性質也重現,這稱為復性。

  (二)蛋白質的吸收光譜

  1.色氨酸、酪氨酸→280nm最大吸收峰。

  2.應用:可用于蛋白質的含量測定。

  (三)蛋白質的沉淀

  1.蛋白質的膠體性質:醫(yī)學教|育網|收集整理蛋白質分子顆粒大小在1~100nm膠體范圍之內。維持蛋白質溶液穩(wěn)定的因素有兩個:

  (1)水化膜:蛋白質顆粒表面大多為親水基團,可吸引水分子,使顆粒表面形成一層水化膜,從而阻斷蛋白質顆粒的相互聚集,防止溶液中蛋白質的沉淀析出。

  (2)同種電荷:在pH≠pI的溶液中,蛋白質帶有同種電荷。pH>pI,蛋白質帶負電荷;pH<pI,蛋白質帶正電荷。同種電荷相互排斥,阻止蛋白質顆粒相互聚集,發(fā)生沉淀。

  2.沉淀蛋白質的方法:

 、冫}析法:在蛋白質溶液中加入大量的硫酸銨、硫酸鈉或氯化鈉等中性鹽,破壞蛋白質的水化膜和中和電荷,使蛋白質顆粒相互聚集,發(fā)生沉淀。

 、诒恋矸ǎ菏褂帽恋頃r,必須在0~4℃低溫下進行,丙酮用量一般10倍于蛋白質溶液體積,蛋白質被丙酮沉淀時,應立即分離,否則蛋白質會變性,除了丙酮以外,也可用乙醇沉淀。

  (四)蛋白質的兩性解離及等電點

  1.蛋白質是兩性電解質,其解離程度取決于所處溶液的酸堿度。

  2.等電點(pI)

  在某一pH的溶液中,蛋白質解離成陽離子和陰離子的趨勢及程度相等,成為兼性離子,呈電中性。此時溶液的pH值稱為該蛋白質的等電點。

  (五)蛋白質的呈色反應

  有茚三酮反應、雙縮脲反應等。

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