1.待細胞生長達一定數量后，倒出舊培養(yǎng)液，用胰酶消化后，Hanks沖洗2次，加入不含血清的培養(yǎng)液，吹打制成細胞懸液。

　　2.取編號為A、B、C三個培養(yǎng)瓶。首先把懸液接種入A培養(yǎng)瓶中，置溫箱中靜止培養(yǎng)5～20分鐘后，輕輕傾斜培養(yǎng)瓶，讓液體集中瓶角后慢慢吸出全部培養(yǎng)液，再接種入B培養(yǎng)瓶中后，向A瓶中補充少許完全培養(yǎng)液置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。

　　3.培養(yǎng)B瓶中細胞5～20分鐘后，按處理A的方法，把培養(yǎng)液注入C培養(yǎng)瓶中，醫(yī)學教.育網搜集整理再向B瓶補加完全培養(yǎng)基。