方法名稱(chēng)：

小柴胡顆粒－黃芩苷的測(cè)定－高效液相色譜法

應(yīng)用范圍：

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定小柴胡顆粒中黃芩苷的含量。

本方法適用于中成藥小柴胡顆粒。

方法原理：

本品加70%乙醇超聲處理，放冷，補(bǔ)重，搖勻，濾過(guò)，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)315nm處檢測(cè)黃芩苷的吸收值，計(jì)算出其含量。

試劑：

1. 70%乙醇

2. 甲醇

3. 磷酸

儀器設(shè)備：

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2色譜條件

2.1流動(dòng)相：甲醇 水 磷酸 =47 53 0.2

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：315nm

2.3柱溫：室溫

試樣制備：

1. 稱(chēng)取供試品

取裝量差異項(xiàng)下的本品，研細(xì)，取約3g或1.5g（無(wú)蔗糖），精密稱(chēng)定，為供試品。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取黃芩苷對(duì)照品12mg，置100mL量瓶中，加70%乙醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5mL，置10mL量瓶中，加70%乙醇至刻度，搖勻，制成每1mL含黃芩苷60mg的溶液。

3. 供試品溶液的制備

取裝量差異項(xiàng)下的本品，研細(xì)，取約3g或1.5g（無(wú)蔗糖），精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇50mL，密塞，稱(chēng)定重量，超聲處理（功率250W，頻率50kHz）30分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，加70%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

操作步驟：

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)315nm處測(cè)定黃芩苷（C21H18O11）的峰面積，計(jì)算出其含量。

參考文獻(xiàn)：

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p357。