方法名稱： 阿替洛爾原料藥－阿替洛爾－高效液相色譜法

應用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定阿替洛爾原料藥中阿替洛爾的含量。

本方法適用于阿替洛爾原料藥。

方法原理： 供試品經(jīng)流動相溶解并定量稀釋，加入內(nèi)標后再經(jīng)流動相稀釋，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長275nm處檢測阿替洛爾的峰面積，計算出其含量。

試劑： 1. 磷酸鹽緩沖液

2. 甲醇

3. 辛烷磺酸鈉

4. 非那西丁

儀器設備： 1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按阿替洛爾峰計算應不低于2000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：磷酸鹽緩沖液 甲醇=7 3，每1000mL中含辛烷磺酸鈉1.30g

2.2 檢測波長：275nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備： 1. 磷酸鹽緩沖液

取磷酸二氫鉀6.8g，加水溶解并稀釋至1000mL，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0。

2. 內(nèi)標溶液的制備

精密稱取非那西丁適量，加流動相制成每1mL中含80µg的溶液，即為內(nèi)標溶液。

3. 對照品溶液的制備

精密稱取阿替洛爾對照品適量，加流動相適量，超聲處理20分鐘使溶解，用流動相定量稀釋成每1mL中含0.32mg的溶液，精密量取該溶液與內(nèi)標溶液各5mL，置25mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即為對照品溶液。

4. 供試品溶液的制備

精密稱取供試品適量，加流動相適量，超聲處理20分鐘使溶解，用流動相定量稀釋成每1mL中含0.32mg的溶液，精密量取該溶液與內(nèi)標溶液各5mL，置25mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長275nm處測定阿替洛爾（C14H22N2O3）的峰面積，計算出其含量。

參考文獻： 中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005版，二部，p.299。