蛋白質(zhì)的沉淀

2010-12-05 11:26 　來(lái)源：醫(yī)學(xué)教育網(wǎng) 　　打印 | 收藏 |

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　　1.蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)：醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)|收集整理蛋白質(zhì)分子顆粒大小在1～100nm膠體范圍之內(nèi)。維持蛋白質(zhì)溶液穩(wěn)定的因素有兩個(gè)：

　�。�1）水化膜：蛋白質(zhì)顆粒表面大多為親水基團(tuán)，可吸引水分子，使顆粒表面形成一層水化膜，從而阻斷蛋白質(zhì)顆粒的相互聚集，防止溶液中蛋白質(zhì)的沉淀析出。

　�。�2）同種電荷：在pH≠pI的溶液中，蛋白質(zhì)帶有同種電荷。pH＞pI，蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷；pH＜pI，蛋白質(zhì)帶正電荷。同種電荷相互排斥，阻止蛋白質(zhì)顆粒相互聚集，發(fā)生沉淀。

　　2.沉淀蛋白質(zhì)的方法：

　�、冫}析法：在蛋白質(zhì)溶液中加入大量的硫酸銨、硫酸鈉或氯化鈉等中性鹽，破壞蛋白質(zhì)的水化膜和中和電荷，使蛋白質(zhì)顆粒相互聚集，發(fā)生沉淀。

　�、诒恋矸ǎ菏褂帽恋頃r(shí)，必須在0～4℃低溫下進(jìn)行，丙酮用量一般10倍于蛋白質(zhì)溶液體積，蛋白質(zhì)被丙酮沉淀時(shí)，應(yīng)立即分離，否則蛋白質(zhì)會(huì)變性，除了丙酮以外，也可用乙醇沉淀。

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