鑒定感染細(xì)菌種屬的方法有什么?
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1.細(xì)菌種屬的鑒定
DNA堿基組成的測定 G+C mol%含量不同的細(xì)菌,為不同種細(xì)菌;含量相同的可能為不同種的細(xì)菌。細(xì)菌的G+C mol%相當(dāng)穩(wěn)定,不受培養(yǎng)條件、菌齡和其他外界因素影響。最常用的方法是熱變性法。
DNA-DNA雜交 DNA雜交可得出DNA之間核苷酸順序的互補(bǔ)程度醫(yī)學(xué)|教育|網(wǎng)搜集整理,從而推斷不同細(xì)菌基因組間的同源性。
16S rRNA同源性分析 rRNA-DNA雜交、16S rRNA序列測定、16S-23S rRNA序列測定
此外限制性內(nèi)切酶長度多態(tài)性分析(RFLP)、脈沖場凝膠電泳(PFGE)、隨機(jī)引物擴(kuò)增法(RAPD)等技術(shù)常用于菌株間的差異比較。
2.細(xì)菌種屬特異基因
某些基因?yàn)榧?xì)菌種特有或?qū)俟灿?,通過對(duì)這些基因的檢測可以鑒定細(xì)菌的種或?qū)佟H缇幋a吸附和侵襲上皮細(xì)胞表面蛋白的inv基因:invA、invB、invC、invD、invE等是一組只存在于致病性沙門菌中的獨(dú)特的保守基因序列。鞭毛蛋白dlh基因通常只存在于傷寒沙門菌;IS6110、IS986插入片段為結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群所擁有等。
3.細(xì)菌毒力基因
可以測定霍亂弧菌的霍亂毒素基因、產(chǎn)腸毒素大腸埃希菌的耐熱(ST)和不耐熱腸毒素(LT)以及白喉棒狀桿菌的外毒素基因以示相應(yīng)的細(xì)菌存在。
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