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檢驗師:《答疑周刊》2020年第37期

2020-05-20 16:28 來源:醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)
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微生物學(xué)及檢驗》重要考點(二)

1.常用的堿性染料有堿性復(fù)紅、結(jié)晶紫、亞甲藍等。

2.常用的酸性染料有伊紅、剛果紅等。

3.電離后顯色離子帶正電荷,易與帶負電荷的被染物結(jié)合。由于細菌的等電點在pH2~5之間,在堿性、中性、弱酸性的環(huán)境中細菌均帶負電荷,易與帶正電荷的染料結(jié)合而著色。

4.培養(yǎng)基種類:

(1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基:含有基礎(chǔ)生長所需的基本營養(yǎng)成分,最常用的是肉浸液,俗稱肉湯,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨?;A(chǔ)培養(yǎng)基廣泛用于細菌的增菌、檢驗,也是制備其他培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分。

(2)營養(yǎng)培養(yǎng)基:在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中可加入葡萄糖、血液、生長因子等特殊成分,供營養(yǎng)要求較高的細菌和需要特殊生長因子的細菌生長。最常用的是血瓊脂平板、巧克力血平板等。

(3)鑒別培養(yǎng)基:利用細菌分解糖類和蛋白質(zhì)的能力及其代謝產(chǎn)物的不同,在培養(yǎng)基中加入特定的作用底物和指示劑,觀察細菌生長過程中分解底物所釋放的不同產(chǎn)物,通過指示劑的反應(yīng)不同來鑒別細菌。例如糖發(fā)酵管、克氏雙糖鐵瓊脂(KIA)、伊紅-亞甲藍瓊脂和動力-吲哚-尿素(MIU)培養(yǎng)基等。

(4)選擇培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入抑制劑,去抑制標本中的雜菌生長,有助于所選擇的細菌種類的生長。例如培養(yǎng)腸道致病菌的SS瓊脂,其中的膽鹽能抑制革蘭陽性菌,枸櫞酸鈉和煌綠能抑制大腸埃希菌,因而使致病的沙門菌、志賀菌容易分離到。

(5)特殊培養(yǎng)基:包括厭氧培養(yǎng)基和細菌L型培養(yǎng)基等。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基,除含營養(yǎng)成分外,還加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢,如皰肉培養(yǎng)基、巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基等。后者是針對細胞壁缺損的細菌L型,由于胞內(nèi)滲透壓較高,故培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。

5.細菌的接種與分離技術(shù):

(1)常用的平板劃線分離法有以下兩種:①連續(xù)劃線分離法:此法主要用于雜菌不多的標本。②分區(qū)劃線分離法:本法適用于雜菌量較多的標本。

(2)斜面接種法:該法主要用于單個菌落的純培養(yǎng)、保存菌種或觀察細菌的某些特性。

(3)液體接種法:多用于一些液體生化試驗管的接種。

(4)穿刺接種法:此法主要用于半固體培養(yǎng)基、明膠及雙糖管的接種。

(5)傾注平板法:測定牛乳、飲水和尿液等標本細菌數(shù)時常用此方法。

(6)涂布接種法:常用于紙片法藥物敏感性測定,也可用于被檢標本中的細菌計數(shù)。

6.血瓊脂平板上的溶血分類:

(1)α溶血:菌落周圍血培養(yǎng)基變?yōu)榫G色環(huán)狀;紅細胞外形完整無缺。

(2)β溶血:紅細胞的溶解在菌落周圍形成一個完全清晰透明的環(huán)。

(3)γ溶血:菌落周圍的培養(yǎng)基沒有變化;紅細胞沒有溶解或無缺損。

(4)雙環(huán):在菌落周圍完全溶解的暈圈外有一個部分溶血的第二圓圈。

7.細菌的生物化學(xué)試驗章節(jié)內(nèi)容均需要掌握。

8.自動血培養(yǎng)檢測系統(tǒng)的基本原理是檢測細菌和真菌生長時所釋放的二氧化碳(CO2)來作為血液中有無微生物存在的指標。

9.葡萄球菌:

(1)本屬菌革蘭染色陽性,形似葡萄串狀。觸酶試驗陽性。

(2)抵抗力:對理化因素抵抗力強,耐熱,耐干燥,耐高鹽,是抵抗力最強的無芽胞細菌。

(3)致病性:①食物中毒,急性胃腸炎;②燙傷樣皮膚綜合征;③中毒性休克綜合征;④葡萄球菌性腸炎。

(4)金黃色葡萄球菌:觸酶試驗陽性、血漿凝固酶試驗陽性、甘露醇發(fā)酵試驗陽性、對新生霉素敏感。

表皮葡萄球菌:觸酶試驗陽性、血漿凝固酶試驗陰性、對新生霉素敏感。

腐生葡萄球菌:觸酶試驗陽性、血漿凝固酶試驗陰性、對新生霉素耐藥。

10.腸球菌屬能在高鹽(6.5%NaCl)、高堿(pH9.6)、40%膽汁培養(yǎng)基上和10~45℃環(huán)境下生長,并對許多抗菌藥物表現(xiàn)為固有耐藥。能水解吡咯烷酮-β-萘基酰胺(PYR)。

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