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細(xì)胞生物學(xué):肌組織細(xì)胞培養(yǎng)

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  1)骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)

  1.殺死動物,無菌取大腿肌組織,切成0.3~0.5厘米小塊。

  2.用不含鈣鎂離子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,無菌紗網(wǎng)或紗布濾過,合成培養(yǎng)基加10%小牛血清培養(yǎng),為促進分化可加1%的胎汁。

  3.細(xì)胞接種量為2×106/皿,接種在膠原或明膠的底物上能促進細(xì)胞分化。明膠制備比較簡單,常用Hanks液配的0.01%明膠。

  2)  肌細(xì)胞培養(yǎng)

  1.選新鮮受精雞卵,置溫箱中孵育(溫箱中放有水槽,以維持箱內(nèi)溫度),每日翻動一次(180度),孵育9~12天。

  2.取雞胎法相間《組織培養(yǎng)和分子細(xì)胞學(xué)技術(shù)》53頁。

  3.用眼科剪剪開胸腔,剝出心臟,置入皿中用Hanks液漂洗1~2次。

  4.小心剪除大的動靜脈,保留心室肌,用組織塊或消化培養(yǎng)法均可。

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