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斑點(diǎn)免疫層析試驗(yàn)是臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)主任醫(yī)師考試涉及的知識(shí)點(diǎn),醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理了相關(guān)資料以便大家更好地復(fù)習(xí)。
(一)原理
斑點(diǎn)免疫層析試驗(yàn)簡(jiǎn)稱免疫層析試驗(yàn)(ICA),也以硝酸纖維素膜為載體,但利用了微孔膜的毛細(xì)血管作用,滴加在膜條一端的液體慢慢向另一端滲移,猶如層析一般。
(二)試劑和操作
免疫層析試驗(yàn)以單克隆雙抗體夾心法為例。試驗(yàn)所用試劑全部為干試劑,多個(gè)試劑被組合在一個(gè)約6mm×70mm的塑料板條上,成為一單一試劑條,試劑條上端(A)和下端(B)分別粘貼吸水材料,免疫金復(fù)合物干片粘貼在近下端(C)處,緊貼其上為硝酸纖維素膜條。硝酸纖維素膜條上有兩個(gè)反應(yīng)區(qū)域,測(cè)試區(qū)(T)包被有特異抗體,參照區(qū)(R)包被有抗小鼠IgG.
測(cè)定時(shí)將試紙條下端浸入液體標(biāo)本中,下端吸水材料即吸取液體向上端移動(dòng),流經(jīng)C處時(shí)使干片上的免疫金復(fù)合物復(fù)溶,并帶動(dòng)其向膜條滲移。若標(biāo)本中有待測(cè)特異抗原,其時(shí)可與免疫金復(fù)合物之抗體結(jié)合,此抗原抗體復(fù)合物流至測(cè)試區(qū)即被固相抗體所獲,在膜上顯出紅色反應(yīng)線條(T)。過剩的免疫金復(fù)合物繼續(xù)前行,至參照區(qū)與固相小鼠IgG結(jié)合(免疫金復(fù)合物中的單克隆抗體為小鼠IgG),而顯出紅色質(zhì)控線條(R)。反之,陰性標(biāo)本則無反應(yīng)線條,而僅顯示質(zhì)控線條。
斑點(diǎn)免疫層析試驗(yàn)在試劑形式和操作步驟上較前述的幾種免疫測(cè)定法都更為簡(jiǎn)化,只用一個(gè)試劑,只有一步操作。
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