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補(bǔ)體總活性測(cè)定是臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)主任醫(yī)師考試涉及的知識(shí)點(diǎn),醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理了相關(guān)資料以便大家更好地復(fù)習(xí)。
(一)補(bǔ)體總活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理
補(bǔ)體最主要的活性是溶細(xì)胞作用。特異性抗體與紅細(xì)胞結(jié)合后可激活補(bǔ)體,導(dǎo)致紅細(xì)胞表面形成跨膜小孔,使胞外水分滲入,引起紅細(xì)胞腫脹而發(fā)生溶血。補(bǔ)體溶血程度與補(bǔ)體的活性相關(guān),但非直線關(guān)系。在一個(gè)適當(dāng)?shù)?、穩(wěn)定的反應(yīng)系統(tǒng)中,溶血反應(yīng)對(duì)補(bǔ)體的劑量依賴呈一特殊的S形曲線。如以溶血百分率為縱坐標(biāo),相應(yīng)血清量為橫坐標(biāo),可見在輕微溶血和接近完全溶血處,對(duì)補(bǔ)體量的變化不敏感。S形曲線在30%~70%之間最陡,幾乎呈直線,補(bǔ)體量的少許變動(dòng),也會(huì)造成溶血程度的較大改變,即曲線此階段對(duì)補(bǔ)體量的變化非常敏感。因此,實(shí)驗(yàn)常以50%溶血作為終點(diǎn)指標(biāo),它比100%溶血更為敏感,這一方法稱為補(bǔ)體50%溶血實(shí)驗(yàn)即CH50. 考試用書
(二)檢測(cè)試劑
綿羊紅細(xì)胞;溶血素;稀釋緩沖液。
(三)方法評(píng)價(jià)
CH50試驗(yàn)是測(cè)定經(jīng)典途徑總補(bǔ)體溶血活性,所反映的是補(bǔ)體9種成分的綜合水平。方法簡(jiǎn)便、快速,但敏感性較低。補(bǔ)體的溶血活性除與試驗(yàn)中反應(yīng)體積成反比外,還與反應(yīng)所用緩沖液的pH、離子強(qiáng)度、鈣鎂濃度、綿羊紅細(xì)胞數(shù)量和反應(yīng)溫度有一定關(guān)系。緩沖液pH和離子強(qiáng)度增高,補(bǔ)體活性下降,雖可穩(wěn)定溶血系統(tǒng),但過量則反而抑制溶血反應(yīng),故實(shí)驗(yàn)時(shí)對(duì)反應(yīng)的各個(gè)環(huán)節(jié)應(yīng)嚴(yán)加控制,統(tǒng)一步驟。
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