距離2019年考試越來越近了，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理了“胰島素的提取與制備”的內(nèi)容，希望可以幫助考生順利備考。

胰島素的人工合成是科研領(lǐng)域內(nèi)一項(xiàng)重大成就。目前在生產(chǎn)中系用家畜（牛、羊、豬）或魚類之新鮮胰臟以酸性乙醇破壞其胰酶后自胰島中獲得的一種胰腺內(nèi)分泌物。

胰島素的性質(zhì)如下：

胰島素為白色或類白色無定形粉末，易溶于稀酸或稀堿水溶液中，也易溶于酸性（或堿性）稀醇（80%以下）和稀丙酮水溶液中，在其他無水有機(jī)溶媒中均不溶。在酸性溶液中（如pH3．5）較穩(wěn)定，在堿性溶液中極易失活性，其他凡能改變蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的因素如加熱（800c以上）、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿和蛋白酶等都可使胰島素受到破壞。

胰島索是一種分子量較小的蛋白質(zhì)激素，其基本結(jié)構(gòu)單位（單體）分子量近6000，其二聚體分子量為12，000，由四個(gè)多肽鍵鏈以六個(gè)二硫鍵相連結(jié)而成。其中含胱氨酸約占12%，胰島素的生理效能與此種氨基酸中二硫鍵有著極密切的關(guān)系，任何一個(gè)二硫鍵斷裂都能使胰島素失去活力。

因胰島素屬于蛋白質(zhì)，所以它具有一般蛋白質(zhì)性質(zhì)。近數(shù)十年來國內(nèi)外生產(chǎn)胰島素的方法主要有兩種：一是“減壓濃縮法”；另一種是“乙醚沉淀法”，即是將酸性乙醇提取液經(jīng)過初步提純后用大量乙醚將胰島素沉淀下來，然后制成纖維狀胰島素再精制成結(jié)晶。由于以上兩種方法均不甚理想。近年來又在探索新的制備方法，其中以“海藻酸吸附法”較為成熟，我國亦試制成功，但用于工業(yè)生產(chǎn)上，還須進(jìn)一步改進(jìn)。在實(shí)際生產(chǎn)中，中國目前仍用“減壓濃縮法”，現(xiàn)將“減壓濃縮法”生產(chǎn)胰島索介紹如下：

提取粗制品：

將新鮮或冰凍豬胰（牛胰更好）除去結(jié)締組織等雜質(zhì)，絞碎成冰胰漿。稱重量置提取罐中，加入1．5——2．0倍量的酸性酒精溶液，使PH為2．5——3．0，醇含量為70%左右，在溫度為13——150C攪拌提取3h,壓濾，使浸液盡量濾出。殘?jiān)儆蒙戏ㄌ崛∫淮巍?

合并二次浸出液，放堿化罐中，在10——150C下加入氨水，使pH達(dá)8．2——8，4，拌攪35/min立即壓濾，于澄清的濾液中迅速加入24mol/L硫酸使pH調(diào)至2．5——3．0。在0℃左右放置過夜使酸性雜蛋白沉降，分取清液，真空濃縮（300C以下），使?jié)饪s液量到原體積1/7——1/9，將濃縮液在10min之內(nèi)迅速加溫至500G立即用冰冷卻至00C，放置3h，將上層脂肪分離（回收胰島素），澄清的濃縮液，調(diào)pH達(dá)2．5，在20——250C下攪拌加入溶液容積25%的精鹽，使全部溶解，置冷處放置3——4h沉淀，用絹布濾集沉淀，再用無水丙酮洗滌數(shù)次（除去剩余的脂肪和水），300C以下真空干燥得粗制品。

精制：

稱取粗制品用pH2．2的7——10倍量的酸水溶解，加30%（按酸水容積）冷丙酮，用5mol/LNH 40H調(diào)至pH 4.2，再補(bǔ)加所用氨水量的30%冷丙酮。在5℃以下放置過夜，抽濾，沉淀留用回收胰島素。取濾液用5mol/LNH4OH調(diào)至pH 6．2——6．4，加入20氯化鋅（ZnC12），如pH變偏酸再調(diào)至pH6.0，在冰箱中放置過夜，抽濾，濾液口收胰島素。濾餅稱重，每克干物約用50ml 20% 枸椽酸溶解。加入固體ZnC12 0．O8g,加丙酮16m1，攪拌均勻，補(bǔ)加水至100 m1，調(diào)pH 6．0——6．2，放冰箱中48 h以上析出結(jié)晶，過濾，濾餅收??；濾出母液按上條件，在冰箱中放置2——3d,尚可收口部分結(jié)晶。取結(jié)晶，用丙酮洗2次，乙醚洗1次，置P205的真空干燥中干燥，即得成品，測定生物效價(jià)。

制劑：

胰島素口服能受胃腸消化酶分解而失效，因而必須制成注射液：有胰島素注射液、蛋白鋅胰島素注射液、精蛋白鋅胰島素注射液等。

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