舊書不厭百回讀,熟讀精思子自知。“藥物分析知識點--紫外分光光度法”醫(yī)學教育網(wǎng)小編專門整理如下,希望對各位考生備考復(fù)習有所幫助。
1.儀器的校正和檢定
由于溫度變化對機械部分的影響,儀器的波長經(jīng)常會略有變動,因此除應(yīng)定期對所用的儀器進行全面校正檢定外,還應(yīng)于測定前校正測定波長。常用汞燈中的較強譜線237.83、 253.65、 275.28、296.73、313.16、334.15、365.02、404.66、435.83、546.07與576.96nm,或用儀器中氘燈的486.02與656.10nm譜線進行校正,鈥玻璃在279.4、287.5、333.7、360.9、418.5、460.0、484.5、 536.2與637.5nm波長處有尖銳吸收峰,也可作波長校正用,但因來源不同會有微小的差別,使用時應(yīng)注意。
吸收度的準確度可用重鉻酸鉀的硫酸溶液檢定。取在120℃干燥至恒重的基準重鉻酸鉀約60mg,精密稱定,用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀釋至1000ml,按下表規(guī)定的波長處測定并計算其吸收系數(shù)。 規(guī)定的吸收系數(shù)如下表,相對偏差可在±1%以內(nèi)。
波長 (nm) 235(最小) 257(最大) 313(最?。?350(最大)
吸收系數(shù)E1% 1cm 124.5 144.0 48.62 106.6
雜散光的檢查可按下表的試劑和濃度,配制成水溶液,置1cm石英吸收池中,在下表規(guī)定的波長處測定透光率,應(yīng)符合表中的規(guī)定。
試劑 濃度% (g/ml) 測定用波長(nm) 透光率 (%)
碘化鈉 1.00 220 =(A/A)C
式中
C為供試品溶液的濃度;
A為供試品溶液的吸收度;
C為對照品溶液的濃度;
A為對照品溶液的吸收度醫(yī),學教育網(wǎng)。
(2) 吸收系數(shù)法
按各品種項下的方法配制供試品溶液,在規(guī)定的波長處測定其吸收度,再以該品種在規(guī)定條件下的吸收系數(shù)計算含量。用本法測定時,應(yīng)注意儀器的校正和檢定。
(3) 計算分光光度法
采用計算分光光度法應(yīng)慎重。本法有多種,使用時均應(yīng)按各品種項下規(guī)定的方法進行。當吸收度處在吸收曲線的陡然上升或下降的部位測定時,影響精度的因素較多,故對照品和供試品測試條件應(yīng)盡可能一致。若測定時不用對照品,如維生素A測定法,則應(yīng)在測定時對儀器作仔細的校正和檢定。
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