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有關(guān)藥物分析復(fù)習(xí),以下是醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編整理的“重組蛋白的高效表達(dá)”,具體相關(guān)內(nèi)容,請考生查看!
重組蛋白在大腸桿菌(E. coli)高效表達(dá)時,往往以不溶的、無活性的蛋白聚集體,即包涵體(inclusion body)的形式存在于細(xì)胞內(nèi)。必須從細(xì)胞內(nèi)分離出包涵體,采用高濃度變性劑(如7.0mol/L鹽酸胍、8.0mol/L脲)溶解包涵體,然后除去變性劑或降低變性劑的濃度,使包涵體蛋白得以復(fù)性,最后再用色譜法使目標(biāo)蛋白質(zhì)得到純化。其中包涵體蛋白的復(fù)性和純化是整個過程中的核心。
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