酶活力測(cè)定的影響因素概述：

1.反應(yīng)速度

大多數(shù)酶促反應(yīng)是可逆反應(yīng)，其速度既受底物濃度的影響，也受產(chǎn)物生成量的影響。當(dāng)?shù)孜餄舛容^高時(shí)，在反應(yīng)的初期，其濃度變化甚微，產(chǎn)物生成量也很少，此時(shí)反應(yīng)速度可看作是恒定的。酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)中所指速度就是反應(yīng)的初速度醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。

2.底物濃度

米氏方程ν=νmax【S】/Km+【S】是反映酶促反應(yīng)速度與底物濃度關(guān)系的方程式，其中Km稱(chēng)米氏常數(shù)。

Km值是酶的特征常數(shù)之一，只與酶的性質(zhì)有關(guān)，而與酶濃度無(wú)關(guān)。不同的酶，Km值不同。同一個(gè)酶有幾種底物時(shí)，則對(duì)每一種底物各有一特定的Km值，其中Km值最小的底物一般稱(chēng)為該酶的最適底物或天然底物。

綜上所述，根據(jù)酶的特性及定量原理，測(cè)定酶活力時(shí)，必須注意以下幾點(diǎn)：

（1）酶促反應(yīng)過(guò)程中，只有最初一段時(shí)間內(nèi)反應(yīng)速度與酶濃度成正比，隨著反應(yīng)時(shí)間的延長(zhǎng)，反應(yīng)速度即逐漸降低。

（2）要規(guī)定一定的反應(yīng)條件，如時(shí)間、溫度、pH等，并在酶測(cè)定過(guò)程中保持這些反應(yīng)條件的恒定，如溫度不得超過(guò)規(guī)定溫度的士1℃，pH應(yīng)恒定。

（3）配制的底物濃度應(yīng)準(zhǔn)確且足夠大，底物液中應(yīng)加入不抑制該酶活力的防腐劑并保存于冰箱中，以防止底物被分解。

（4）標(biāo)本要新鮮，由于絕大多數(shù)酶可因久置而活力降低，標(biāo)本如無(wú)法及時(shí)測(cè)定，應(yīng)保存于冰箱中。用血漿時(shí)，應(yīng)考慮到抗凝劑對(duì)酶反應(yīng)的影響。有些酶在血細(xì)胞、血小板中的濃度比血清高，為此在采血、分離血清時(shí)，應(yīng)注意防止溶血和白細(xì)胞的破裂。

（5）在測(cè)定過(guò)程中，所用儀器應(yīng)絕對(duì)清潔，不應(yīng)含有酶的抑制物，如酸、堿、蛋白沉淀劑等。