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胰島素粗制提取品

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  將新鮮或冰凍豬胰(牛胰更好)除去結(jié)締組織等雜質(zhì),絞碎成冰胰漿。稱重量置提取罐中,加入1.5~2.0倍量的酸性酒精溶液,使PH為2.5~3.0,醇含量為70%左右,在溫度為13~150C攪拌提取3h,壓濾,使浸液盡量濾出。殘?jiān)儆蒙戏ㄌ崛∫淮?。合并二次浸出液,放堿化罐中,在10~150C下加入氨水,使pH達(dá)8.2~8.4,拌攪35/min立即壓濾,于澄清的濾液中迅速加入24mol/L硫酸使pH調(diào)至2.5~3.0。在0℃左右放置過夜使酸性雜蛋白沉降,分取清液,真空濃縮(300C以下),使?jié)饪s液量到原體積1/7~1/9,將濃縮液在10min之內(nèi)迅速加溫至500G立即用冰冷卻至0℃,放置3h,將上層脂肪分離(回收胰島素),澄清的濃縮液,調(diào)pH達(dá)2.5,醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)|收集整理在20~250C下攪拌加入溶液容積25%的精鹽,使全部溶解,置冷處放置3~4h沉淀,用絹布濾集沉淀,再用無水丙酮洗滌數(shù)次(除去剩余的脂肪和水),300C以下真空干燥得粗制品。

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主講老師:劉 楝老師

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