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1. 藥劑配制
硫酸二乙酯(DES)不溶于水,先用少量70%酒精溶解,再加水。
有些烷化劑在水中不穩(wěn)定,會發(fā)生"水合作用",因此配好的藥劑不能貯存,應現(xiàn)配現(xiàn)用。一般都是把它們加入到一定酸堿度(pH)的磷酸鹽緩沖液(0.01mol/L)中使用。
亞硝酸也不穩(wěn)定,常在臨使用前將NaNO2加入到醋酸緩沖液(PH4.5),以生成亞硝酸。
2. 試材預處理
干種子 預先浸泡,使細胞活潑,增加敏感性,還可提高膜透性。
細胞處于DNA合成階段(S)時,對誘變劑最敏感。誘變處理應在S階段之前進行。
需層積處理的種子,處理前可用層積代替水浸泡。
3. 誘變處理
?。?)浸漬法 種子、枝條、塊莖浸入誘變劑溶液,或枝條基部插入溶液。
?。?)涂抹或滴液法 藥劑溶液涂抹或緩慢滴在植株、枝條或塊莖的生長點或芽眼上。
(3)注入法 用注射器向植物材料中注入溶液,或?qū)⒉牧先斯た虃?,用浸過誘變劑的棉團包裹切口。
?。?)熏蒸法 密封容器內(nèi)使誘變劑產(chǎn)生蒸汽,對花粉等進行熏蒸。
(5)施入法 培養(yǎng)基中加入低濃度誘變劑溶液。
4. 誘變后處理
處理后的材料,用清水反復沖洗,以降低殘留,避免生理損傷。一般沖洗10-30min或更長時間。漂洗后的材料立即播種或嫁接。