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細胞周期的DNA檢測

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 ?、瘛悠窚蕚洌簻蕚湟韵乱环N或幾種樣品。

  A、組織單細胞懸浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盤細胞)

  B、組織培養(yǎng)細胞

  C、Ficoll-hypaque分離的單核細胞

 ?、?、反應(yīng)體系-DNA低滲緩沖液

  檸檬酸三鈉 0.25g

  Triton-X 100 0.75ml

  Propidium iodide 0.025g

  核糖核酸酶 0.005g

  蒸餾水 250ml

  我們將該DNA低滲溶液于密閉瓶子中存放數(shù)月后并無發(fā)現(xiàn)有任何染色活性的丟失Ⅲ、染色

  1、每一個管子中放入1×106個細胞;

  2、樣品離心后盡可能完全地移去上清液,并且不要打碎沉淀塊;

  3、入1ml的DNA低滲染色緩沖液至沉淀中,并混勻;

  4、樣品于4℃下避光30分鐘或最長不超過1個小時以備流式細胞儀分析。

  注意:延長在低滲緩沖液的曝光時間會引起樣品碎片的增加。

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