1.培養(yǎng)液準(zhǔn)備：取15ml培養(yǎng)瓶數(shù)個(gè)，每瓶?jī)?nèi)分別充入5ml培養(yǎng)液（pH7.2），內(nèi)含：1640培養(yǎng)液（含10%～15%小牛血清），PHA0.1ml，青霉素100單位和鏈霉素100微克/毫升培養(yǎng)液

　　2.抽血針管準(zhǔn)備：取2～5ml針管一支，在消毒后的無(wú)菌操作臺(tái)或無(wú)菌操作箱中安裝好注射器，無(wú)菌抽肝素（100U/mlBBS）少許濕潤(rùn)針管，如動(dòng)作迅速不用肝素亦可。

　　3.采血：用棉簽75%酒精給患者或獻(xiàn)血者的皮膚消毒兩次，縛止血帶，靜脈取血1～2ml.無(wú)菌操作迅速向每一瓶培養(yǎng)中加血0.4～0.5ml，如系外出采血，安裝針管及分裝血液兩步驟亦可在無(wú)菌條件略差的環(huán)境內(nèi)操作，但動(dòng)作要迅速，以減少污染；在采血量不多或不應(yīng)抽血的情況下，亦可在耳垂、手指肚（無(wú)名指）用刺血針采血。

　　4.培養(yǎng)和加秋水仙素：37℃溫箱中培養(yǎng)到60～72小時(shí)之間，此時(shí)細(xì)胞分裂相最多，向每培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加秋水仙素，最終濃度0.02～0.08微克/毫升營(yíng)養(yǎng)液，再培養(yǎng)4～6小時(shí)。

　　5.低滲：1000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘，吸除上清液，加入預(yù)溫過(guò)的0.075MKCl溶液10ml，醫(yī)學(xué)教.育網(wǎng)搜集整理置溫箱中低滲處理15～20分鐘。

　　6.其余步驟與處理傳代細(xì)胞法相同。