1.干粉培養(yǎng)基原倍液的配制

　　1）配制過濾除菌的細(xì)胞培養(yǎng)基

　　1）閱讀培養(yǎng)基使用說明，確定需要添加何種添加劑（如NaHCO3、L-谷氨酰胺、丙酮酸鈉、HEPES等）。

　　2）根據(jù)所需將培養(yǎng)基全部倒入一容器中，用少量注射用水（20℃～30℃）將袋內(nèi)殘留培養(yǎng)基洗下，醫(yī)學(xué)教.育網(wǎng)搜集整理并入容器。加注射用水至總體積的95%，輕微攪拌溶解。

　　3）加入規(guī)定量的碳酸氫鈉及所要添加的物質(zhì)。

　　4）輕微攪拌溶解，加注射用水至規(guī)定體積。

　　5）用1mol/L氫氧化鈉溶液或1mol/L鹽酸溶液調(diào)pH至所需值。

　　6）用0.22μm濾膜正壓過濾除菌。

　　7）溶液應(yīng)在2℃～8℃下避光保存。

　　具體使用方法參照培養(yǎng)基包裝袋上的說明書。

　　2.配制可高壓滅菌細(xì)胞培養(yǎng)基

　　1）根據(jù)所需將培養(yǎng)基全部倒入一容器中，用少量注射用水（20℃～30℃）將袋內(nèi)殘留培養(yǎng)基洗下，并入容器。加注射用水至總體積的95%，輕微攪拌溶解。

　　2）在121℃、15psi下滅菌15分鐘。

　　3）待溶液冷卻至室溫，加入無菌0.2mol/LL-谷氨酰胺溶液規(guī)定體積、無菌7.5%（w/v）碳酸氫鈉溶液規(guī)定體積，加注射用水（20℃～30℃）至規(guī)定體積，混勻。

　　4）如果必要，用1mol/L氫氧化鈉溶液或1mol/L鹽酸溶液調(diào)pH至所需值。

　　5）溶液應(yīng)在2℃～8℃下避光保存。