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革蘭氏染色法基本原理

2010-12-20 16:40 醫(yī)學教育網(wǎng)
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  革蘭氏染色反應是細菌分類和鑒定的重要性狀。它是1884年由丹麥醫(yī)師Gram創(chuàng)立的。革蘭氏染色法不僅能觀察到細菌的形態(tài)而且還可將所有細菌區(qū)分為兩大類:染色反應呈藍紫色的稱為革蘭氏陽性細菌,用G+表示;染色反應呈紅色(復染顏色)的稱為革蘭氏陰性細菌,用G-表示。細菌對于革蘭氏染色的不同反應,是由于它們細胞壁的成分和結(jié)構不同而造成的。革蘭氏陽性細菌的細胞壁主要是由肽聚糖形成的網(wǎng)狀結(jié)構組成的,在染色過程中,當用乙醇處理時,由于脫水而引起網(wǎng)狀結(jié)構中的孔徑變小,通透性降低,使結(jié)晶紫-碘復合物被保留在細胞內(nèi)而不易脫色,因此,呈現(xiàn)藍紫色;革蘭氏陰性細菌的細胞壁中肽聚糖含量低,而脂類物質(zhì)含量高,當用乙醇處理時,脂類物質(zhì)溶解,細胞壁的通透性增加,使結(jié)晶紫-碘復合物易被乙醇抽出而脫色,然后又被染上了復染液(番紅)的顏色,因此呈現(xiàn)紅色。

  革蘭氏染色需用四種不同的溶液:堿性染料初染液;媒染劑;脫色劑和復染液。堿性染料初染液的作用象在細菌的單染色法基本原理中所述的那樣,而用于革蘭氏染色的初染液一般是結(jié)晶紫。媒染劑的作用是增加染料和細胞之間的親和性或附著力,即以某種方式幫助染料固定在細胞上,使不易脫落,碘(iodine)是常用的媒染劑。脫色劑是將被染色的細胞進行脫色,不同類型的細胞脫色反應不同,有的能被脫色,有的則不能,脫色劑常用95%的酒精(ethanol)。醫(yī)學教.育網(wǎng)搜集整理復染液也是一種堿性染料,其顏色不同于初染液,復染的目的是使被脫色的細胞染上不同于初染液的顏色,而未被脫色的細胞仍然保持初染的顏色,從而將細胞區(qū)分成G+和G-兩大類群,常用的復染液是番紅。

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