摘 要:目的探討不同基因型和亞型戊型肝炎病毒(HEV)ORF2重組蛋白p166用于抗體檢測的價值,為研發(fā)準確可靠的戊型肝炎診斷試劑提供新的途徑。
方法 用等濃度的不同基因型和亞型HEV p166作為包被抗原,對血清標本進行酶聯(lián)免疫吸附試驗測定。用HEV多基因型通用性引物逆轉錄套式PCR(RT-nPCR)擴增標本中HEV RNA,并測序、分型。
結果 8種不同p166抗原對30份健康獻血者血清無抗原性,對182份來自世界不同國家和地區(qū)的已知HEV抗體陽性血清和7份HEV實驗感染動物血清標本均呈陽性反應,但所得血清抗體滴度的高低與所用抗原的基因型有明顯關系。RT-nPCR檢測的50份中國血清標本中,19份陽性,基因分型均為Ⅳ型,與Ⅳ型中國株p166抗原反應最好。而以同屬于第Ⅲ基因型的豬HEV新西蘭株和人HEV美國株重組p166檢測血清標本,兩者結果差異無統(tǒng)計學意義。以多基因型p166混合抗原建立的ELISA抗體檢測法與兩種市售試劑盒比較,前者敏感性高,特異性好。
結論 不同基因型和亞型的HEV重組蛋白p166對不同血清標本HEV抗體檢測的敏感性高低不同,因此多基因型和亞型p166的混合抗原是HEV抗體檢測的最佳抗原。