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胰蛋白酶的測(cè)定

2009-10-29 16:24 來(lái)源:
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  胰蛋白酶是胰腺分泌的重要消化酶之一,人類(lèi)胰腺細(xì)胞合成兩種主要的胰蛋白酶,通常是以無(wú)活性的酶原形式存在,即胰蛋白酶原-1和胰蛋白酶原-2,它們都儲(chǔ)存在酶原顆粒中,在食道神經(jīng)反射和/或腸道激素(膽囊收縮肽-腸促胰酶素)的刺激下分泌入腸道,腸液中的腸肽酶可以激活胰蛋白酶,胰蛋白酶本身及組織液亦可使其激活,亦可被Ca2+、Mg2+等離子激活。

  兩種胰蛋白酶酶原的電泳遷移率不同,最適pH亦有差別,兩者很少有免疫交叉反應(yīng),因此有可能用免疫方法醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理測(cè)定。

  1.血清胰蛋白酶:雖然胰液中含有大量的胰蛋白酶,正常時(shí)卻很少進(jìn)入血循環(huán),健康人血清中存在的主要為游離胰蛋白酶原-l,沒(méi)有游離的胰蛋白酶。

  急性胰腺炎時(shí),血清胰蛋白酶和淀粉酶平行升高,其峰值可達(dá)參考值上限的2~400倍,兩種胰蛋白酶的分布和急性胰腺炎的類(lèi)型及嚴(yán)重程度有關(guān)。輕型者80%~99%為游離胰蛋白酶原-1及極少的結(jié)合型的胰蛋白酶-1;而重型者游離胰蛋白酶原-1可低到胰蛋白酶總量的30%,大部分以結(jié)合形式存在,它可以和α1-抗胰蛋白酶或α2-巨球蛋白結(jié)合。

  由于有上面所說(shuō)的臨床意義,許多人都想把血清胰蛋白酶測(cè)醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理定用于胰腺疾病診斷,但因?yàn)檠逯羞€有其他蛋白酶也能水解試劑中的底物,同時(shí)還有蛋白酶的抑制物存在,這些都會(huì)影響測(cè)定結(jié)果,所以以前臨床很少測(cè)定血清胰蛋白酶。但現(xiàn)在已經(jīng)有了測(cè)定胰蛋白酶原-1、胰蛋白酶-1、胰蛋白酶-1:α1-抗胰蛋白酶復(fù)合物的免疫方法,不過(guò)目前還沒(méi)有廣泛用于臨床。其臨床意義和價(jià)值尚需觀察和總結(jié)。

  2.尿胰蛋白酶:由于胰蛋白酶原的分子量比較?。?5kd),所以很容易由腎小球?yàn)V出,但是腎小管對(duì)兩者的回吸收卻不同,對(duì)胰蛋白酶原-2的回吸收低于胰蛋白酶原-1,因此,尿中前者的濃度較大。在急性胰腺炎時(shí)尿中胰蛋白酶原-2的濃度明顯升高。

  有研究報(bào)道急性胰腺炎時(shí)尿胰蛋白酶原-2的特異性為95%,敏感性為94%,說(shuō)明其優(yōu)于淀粉酶,是一個(gè)比較敏感而特異的診斷指標(biāo),而被用做在急診時(shí)的篩選試驗(yàn)。尿胰蛋白酶原-2陰性結(jié)果多半可以除外急性胰腺炎,而陽(yáng)性結(jié)果時(shí)應(yīng)做進(jìn)一步檢查以確定診斷,也應(yīng)做動(dòng)態(tài)觀察。

  現(xiàn)用的尿胰蛋白酶原-2的試紙條定性方法是基醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理于免疫層析的原理。試紙條上有兩種抗人胰蛋白酶原-2抗體,一種標(biāo)記于藍(lán)色乳膠顆粒上,作為檢測(cè)標(biāo)記物,另一種固定在膜上,以捕捉標(biāo)記的顆粒,顯示陽(yáng)性結(jié)果。按要求將試紙條的一部分浸入尿液,如果出現(xiàn)藍(lán)色條帶是為陽(yáng)性。試驗(yàn)可以在床旁進(jìn)行,于5分鐘內(nèi)完成,適合急診應(yīng)用。胰蛋白酶原-2還可用免疫熒光法作定量檢測(cè)。

  急性胰腺炎的診斷要從兩個(gè)方面考慮,即臨床癥狀(急性腹痛等)和實(shí)驗(yàn)室檢查(各項(xiàng)檢查的臨床意義已寫(xiě)在各試驗(yàn)中),但兩者都有不典型的時(shí)候,應(yīng)注意鑒別診斷。

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