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淀粉酶的檢測(cè)

2009-10-29 16:15 來源:
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  胰淀粉酶由胰腺以活性狀態(tài)排入消化道,是最重要的水解碳水化合物的酶,和唾液腺分泌的淀粉酶一樣都屬于α-淀粉酶,作用于α-1,4糖苷鍵,對(duì)分支上的α-1,6糖苷鍵無作用,故又稱淀粉內(nèi)切酶,其作用的最適pH為6.9,可通過腎小球?yàn)V過,是唯一能在正常時(shí)于尿中出現(xiàn)的血漿酶。

  人體的其他組織如卵巢、輸卵管、肺、睪丸、精液、乳腺等的提取物中都發(fā)現(xiàn)有淀粉酶活性;血液、尿液、乳液中也含淀粉酶。血液淀粉酶中主要來自胰腺、唾液腺,尿液中淀粉酶則來自于血液。

  測(cè)定血清淀粉酶同工酶時(shí),發(fā)現(xiàn)有兩個(gè)主要的同工酶區(qū)帶及數(shù)個(gè)次要區(qū)帶。兩個(gè)主要區(qū)帶中的一個(gè)和胰腺的提純物或分泌物電泳的位置相同,因此命名為P-同工酶;另一個(gè)和唾液腺提純物或唾液電泳在同一位置,因此命名為S-同工酶。測(cè)定淀粉酶同工酶有助于對(duì)胰腺疾病的鑒別診斷。

  參考值:限定性底物法:

  血清淀粉酶 220U/L(37℃)

  尿淀粉酶 1200U/L(37℃)

  P同工酶 血清115U/L

  尿800U/L

  新生兒血清淀粉酶約為成年人的18%,主要為S-型,到5歲時(shí)達(dá)成人水平;在一歲內(nèi)測(cè)不出血清P-型淀粉酶,以后緩慢上升,在10~15歲時(shí)達(dá)成人水平。

  血清淀粉酶和尿淀粉酶測(cè)定是胰腺疾病最常用的實(shí)驗(yàn)醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理室診斷方法,當(dāng)罹患胰腺疾病,或有胰腺外分泌功能障礙時(shí)都可引起其活性升高或降低,有助于胰腺疾病的診斷。尿淀粉酶水平波動(dòng)較大,所以用血清淀粉酶檢測(cè)為好,或兩者同時(shí)測(cè)定。淀粉酶活性變化亦可見于某些非胰腺疾患,因此在必要時(shí)測(cè)定淀粉酶同工酶具有其鑒別診斷意義。

  1.血清淀粉酶升高:最多見于急性胰腺炎,是急性胰腺炎的重要診斷指標(biāo)之一,在發(fā)病后2~12h活性開始升高,12~72h達(dá)峰值,3~4天后恢復(fù)正常。淀粉酶活性升高的程度雖然并不一定和胰腺損傷程度相關(guān),但其升高的程度越大,患急性胰腺炎的可能性也越大,因此雖然目前還都用淀粉酶作為急性胰腺炎診斷的首選指標(biāo),但其特異性和靈敏度都還不夠高。當(dāng)懷疑急性胰腺炎時(shí),應(yīng)對(duì)患者血清和尿淀粉酶活性連續(xù)作動(dòng)態(tài)觀察,還可結(jié)合臨床情況及其他試驗(yàn),如胰脂肪酶、胰蛋白酶等測(cè)定共同分析,作出診斷。

  淀粉酶測(cè)定對(duì)監(jiān)測(cè)急性胰腺炎的并發(fā)癥如胰腺假性囊腫,胰腺膿腫亦有價(jià)值,此種時(shí)候血淀粉酶活性多持續(xù)升高。重癥急性胰腺炎時(shí)可以引起胸腔積液或/和腹腔積液,積液中的淀粉酶活性甚至可高于血清淀粉酶活性100倍以上。

  急性胰腺炎的診斷有一定的困難,因?yàn)槠渌备拱Y也可以引起淀粉酶活性升高。所以當(dāng)懷疑急胰腺炎時(shí),除應(yīng)連續(xù)監(jiān)測(cè)淀粉酶外,還應(yīng)結(jié)合臨床情況及其他試驗(yàn),如胰脂肪酶、胰蛋白酶等測(cè)定結(jié)果共同分析,作出診斷。

  慢性胰腺炎淀粉酶活性可輕度升高或降低,但沒有很大的診斷意義。胰腺癌早期淀粉酶活性可見升高。

  淀粉酶活性中度或輕度升高還可見于一些醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理非胰腺疾病,如腮腺炎、急性腹部疾?。ㄏ詽兇┛?、上腹部手術(shù)后、機(jī)械性腸梗阻、腸系膜血管病變、膽道梗阻及急性膽囊炎等)、服用鎮(zhèn)痛劑、酒精中毒、腎功能不良及巨淀粉酶血癥等情況,應(yīng)加以注意。

  血液中淀粉酶能被腎小球?yàn)V過,所以任何原因引起的血清淀粉酶升高時(shí),都會(huì)使尿中淀粉酶排出量增加,尤以急性胰腺炎時(shí)為多見,急性胰腺炎時(shí)腎清除淀粉酶的能力加強(qiáng),其升高可早于血淀粉酶,而下降晚于血淀粉酶。

  2.淀粉酶同工酶:血清淀粉酶除來源于胰腺外,還來源于唾液腺及許多其他組織,所以在淀粉酶活性升高時(shí),同工酶的測(cè)定有助于疾病的鑒別診斷。P-同工酶升高或降低時(shí),說明可能有胰腺疾患;S-同工酶的變化可能是源于唾液腺或其他組織。當(dāng)血清淀粉酶活性升高而又診斷不清時(shí),應(yīng)進(jìn)一步測(cè)定同工酶以助鑒別診斷。有許多方法可以測(cè)定同工酶,瓊酯糖和醋纖膜電泳法都是比較常用的方法。

  淀粉酶的測(cè)定結(jié)果受方法的影響較大,不同方法參考值亦有所不同,臨床所用方法也較多,因此必須了解所用測(cè)定方法和其參考值,才能作出正確的診斷。

  作為胰腺疾病尤其是急性胰腺炎診斷的試驗(yàn),淀粉酶測(cè)定應(yīng)用已久,試驗(yàn)方法曾屢經(jīng)改進(jìn),已經(jīng)有過200多種方法。其試驗(yàn)基本原理都是把病人的標(biāo)本(含淀粉酶)和作為底物的多糖一起進(jìn)行反應(yīng)后,測(cè)定反應(yīng)后的剩余底物或產(chǎn)物來計(jì)算淀粉酶的醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理活性。很久以來一直以淀粉為底物,但由于淀粉來源物質(zhì)不同,其分子結(jié)構(gòu)、分子量變化都很大,因而會(huì)影響到淀粉酶的測(cè)定。多年的研究結(jié)果,認(rèn)為從天然物質(zhì)中提取的淀粉分子結(jié)構(gòu)差異很大,不宜用做底物?,F(xiàn)在已經(jīng)改用限定性底物法,即選用結(jié)構(gòu)明確,性質(zhì)穩(wěn)定的小分子低聚糖作為底物,能產(chǎn)生穩(wěn)定的限定性產(chǎn)物,然后測(cè)定反應(yīng)產(chǎn)物(發(fā)色團(tuán)或葡萄糖)量來計(jì)算淀粉酶活性。

  用做限定性底物的一般有4~7個(gè)葡萄糖(戊糖、庚糖等),并連有發(fā)色團(tuán)如β2-氯-4-硝基酚-G7、ethylidene-G7PNP等。試驗(yàn)中所用的工具酶α-葡糖苷酶來源不同時(shí),其水解淀粉酶作用后產(chǎn)物的程度也不同,也會(huì)影響的測(cè)定結(jié)果。

  很多陰離子有激活淀粉酶的作用,其中以Cl-,Br-為最強(qiáng)。血清甘油三酯濃度高時(shí),可以抑制淀粉酶活性,應(yīng)將標(biāo)本加以稀釋,以降低其影響。由于Ca2+是淀粉酶分子組成的部分,所以除肝素外,一般抗凝劑如草酸鹽,枸櫞酸鹽等因能與Ca2+結(jié)合,抑制淀粉酶活性而不宜應(yīng)用。

  另外應(yīng)該注意淀粉酶的測(cè)定方法操作要簡(jiǎn)單,快速,適于急診應(yīng)用,因?yàn)榧毙砸认傺仔枰M快診斷和治療。

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