不同病種采取不同的標本，如痰、膿液、血液、腦脊液等。涂片經(jīng)革蘭氏染以后鏡檢，根據(jù)典型的革蘭氏色陽性具有莢膜的雙球菌存在，即可作出初步診斷痰或膿液直接劃線接種于血瓊脂平板上，37℃孵育24小時后，挑取α溶血的可疑菌落，作菊糖發(fā)酵試驗、膽汁溶菌和奧普托欣（Optochin，ethylhydrocupreine）敏感試驗進行鑒別。發(fā)酵菊糖、被膽汗溶解，對optochin敏感者，醫(yī)學教|育網(wǎng)搜集整理則多數(shù)為肺炎球菌。腦脊液標本須先經(jīng)血清肉湯增菌后，再接種于血平板。含菌量少或雜菌較多的標本，可接種小白鼠腹腔，18～24小時后，當小白鼠發(fā)病瀕死時，取心血或腹腔滲出液接種血瓊脂平板。菌型鑒定可用凝集試驗、沉淀試驗和莢膜腫脹。