第一節(jié)　體內(nèi)樣品種類

　　血清、血漿的區(qū)別：加入抗凝劑后，全血離心制的血漿。不加抗凝劑，自然沉降后離心制的血清。

　　考點3：尿液的分類與采集

　　尿液的采集：測定尿液中藥物濃度——自然排尿、時間尿測定尿液中藥物總量——自然排尿、各時間段全部尿液

　　第二節(jié)　體內(nèi)樣品處理

　　考點1：體內(nèi)樣品處理的常用方法（1）去除蛋白質(zhì)法（2）綴合物水解法（3）萃取分離法（4）化學(xué)衍生化法

　　考點2：去除蛋白質(zhì)的方法：（1）蛋白質(zhì)沉淀法：加與水混溶的有機(jī)溶劑脫水、加入強(qiáng)酸生成不溶性鹽、加無機(jī)鹽鹽析（2）蛋白分解法——蛋白水解酶（枯草菌溶素）

　　考點3：綴合物水解法（1）酸水解（HCl）：簡便、快速，但專一性差（2）酶水解：β-葡萄糖醛酸苷酶、硫酸酯酶、兩者混合酶，專屬性高

　　考點4：分離純化與濃集常用方法（1）液-液萃取——選用與水不相混溶的有機(jī)溶劑進(jìn)行提?。?）離子對萃取法（3）固相萃取法——利用柱色譜進(jìn)行分離

　　考點5：化學(xué)衍生化法衍生化目的（1）增加組分的穩(wěn)定性（2）改善被測組分的色譜行為（3）增加被測物的檢測靈敏度和選擇性（4）提高對光學(xué)異構(gòu)體分離的能力衍生化方法（5）GC——硅烷化、?；?、烷基化（6）HPLC——熒胺、丹酰氯、鄰苯二醛（柱前衍生化、柱后衍生化）（7）手性衍生化法

　　第三節(jié)　體內(nèi)樣品測定

　　考點1：常用測定方法

　　考點2：定量分析方法驗證（1）特異性內(nèi)源性物質(zhì)的干擾、代謝產(chǎn)物的干擾、同用藥物的干擾要求：6個不同來源的空白體內(nèi)樣品色譜圖、空白體內(nèi)樣品外加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜圖（注明濃度）及用藥后的體內(nèi)樣品色譜圖。（體外分析的專屬性）

　?。?）標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性范圍要求：用至少6個濃度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，應(yīng)使用與待測樣品相同的生物介質(zhì)，線性范圍要能覆蓋全部待測濃度，不允許將線性范圍外推求算未知樣品的濃度。隨行空白體內(nèi)樣品，但標(biāo)準(zhǔn)曲線不包括零點。（體外分析要求至少5個濃度）

　?。?）定量下限標(biāo)準(zhǔn)曲線上的最低濃度點。S/N應(yīng)大于5.實際測定時，滿足3～5個半衰期濃度，或Cmax1/10～1/20.至少5個標(biāo)準(zhǔn)樣品測試結(jié)果證明。（體外分析要求S/N=10）

　?。?）精密度與準(zhǔn)確度樣品選擇：選擇3個濃度的質(zhì)控樣品同時進(jìn)行方法的精密度和準(zhǔn)確度考察。低濃度選擇在定量下限3倍以內(nèi)，高濃度接近于標(biāo)準(zhǔn)曲線的上限附近；中間選一個濃度。每一濃度每批至少測定5個樣品。

　　精密度：批內(nèi)精密度、批間精密度（不同天連續(xù)制備3個分析批）。用RSD表示，要求小于15%，在最低定量限附近小于20%.準(zhǔn)確度：準(zhǔn)確度用相對回收率表示。一般應(yīng)在85%～115%范圍內(nèi)，在最低定量限附近應(yīng)在80%～120%范圍內(nèi)。（體外分析要求95-105%）

　?。?）樣品穩(wěn)定性表示一種分析物在確定條件下醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)，一定時間內(nèi)在給定介質(zhì)中的化學(xué)穩(wěn)定性。

　　要求：根據(jù)具體情況，對含藥生物樣品（或儲備液、樣品處理液）在室溫、冰凍和凍融條件下以及不同存放時間進(jìn)行穩(wěn)定性考察。

　　（6）提取回收率分析過程的提取效率，能反映出樣品預(yù)處理過程中組分丟失的情況，是評價萃取方案優(yōu)劣的指標(biāo)之一。以樣品提取和處理過程前后分析物含量百分比表示。

　　要求：考察高、中、低3個濃度的提取回收率，其值一般應(yīng)一致，但重要的是重現(xiàn)性好。

　　（7）質(zhì)控樣品在生物介質(zhì)中加入已知量待測藥物所配制的樣品，用于質(zhì)量控制。

　?。?）質(zhì)量控制應(yīng)在生物樣品分析方法驗證完成之后開始測試未知樣品，每個未知樣品一般測定一次，必要時可進(jìn)行復(fù)測。

　　每批生物樣品測定時應(yīng)建立新的標(biāo)準(zhǔn)曲線，并平行測定高、中、低3個濃度的質(zhì)控樣品。

　　質(zhì)控樣品測定結(jié)果的偏差一般應(yīng)小于15%.