外源基因又稱(chēng)目的基因，來(lái)源于幾種途徑：化學(xué)合成、酶促合成cDNA，制備的基因組DNA及PCR技術(shù)。細(xì)菌質(zhì)粒、噬菌體和一些病毒DNA均可被改造成基因克隆的載體。

　　二、基因載體的選擇與構(gòu)建：

　　可作為基因載體的DNA分子有質(zhì)粒DNA、噬菌體DNA和病毒DNA，它們經(jīng)適當(dāng)改造后仍具有自我復(fù)制能力，或兼有表達(dá)外源基因的能力。

　　三、外源基因與載體的連接：

　　連接方式有：黏性末端連接、平端連接和人工接頭連接等。

　　四、重組DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞：

　　外源DNA與載體在體外連接成重組DNA分子，需將其導(dǎo)入宿主細(xì)胞。隨受體細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖，重組DNA分子得以復(fù)制、擴(kuò)增。

　　五、重組體的篩選：

　　鑒定哪一菌落或嗜菌斑所含重組DNA分子確實(shí)帶有目的基因，即可得到目的基因的克隆，這一過(guò)程即為篩選或選擇。

　　六、克隆基因的表達(dá)：

　　在原核或真核表達(dá)體系中進(jìn)行表達(dá)，獲得所需要的蛋白質(zhì)。

　　例題（單選）：在分子生物學(xué)領(lǐng)域中，分子克隆主要是指：

　　A.DNA的大量復(fù)制

　　B.DNA的大量剪切

　　C.RNA的大量復(fù)制

　　D.RNA的大量剪切

　　E.反轉(zhuǎn)錄酶