方法名稱： 左金丸—吳茱萸次堿的測定—高效液相色譜法

應用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定左金丸中吳茱萸次堿的含量。

本方法適用于中成藥制劑左金丸。

方法原理： 供試品于錐形瓶中，加乙醇溶解，超聲提取。提取液過濾后進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長345nm處檢測吳茱萸次堿的吸收值，計算出其含量。

試劑： 1. 甲醇

2. 乙醇

3. 乙腈

儀器設備： 1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

Intersil C18色譜分析柱（4.6mm ID×250mm, 粒徑5um），理論板數(shù)為2100。

1.3 紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：乙腈 10%乙腈=50 50

2.2 檢測波長：345nm

試樣制備： 1.對照品溶液的制備

對照品貯備液為10ug/ml乙醇溶液。精密量取吳茱萸次堿對照品貯備液3ml，置25ml 量瓶中，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得（每ml含吳茱萸次堿12ug）。

2. 供試品溶液的制備

取左金丸12g，研為細粉。取左金丸細粉0.7g，精密稱定，置100ml具塞錐形瓶中，加入精密量取的乙醇25ml，精密稱定，水浴加熱提取60min，放冷至室溫，再精密稱定，補足減失的溶劑，混勻，用0.45um濾膜濾過，即得。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 1. 標準曲線的繪制

精密量取吳茱萸次堿對照品貯備液適量，用乙醇稀釋成系列濃度(n=5)，分別取20ul 注入液相色譜儀，記錄色譜峰面積，以峰面積均值X (n=3)對進樣濃度Y (ug/ml) 線性回歸，得回歸方程。

2. 供試品的測定

分別精密吸取上述供試品溶液20μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長345nm處測定吳茱萸次堿的吸收值，計算出其含量。

參考文獻： 潘敏翔，劉昌葉，常華，趙淼，姜韌。HPLC測定左金丸中吳茱萸次堿含量，藥物實踐雜志，2002，20(4)：236-237．