芐星青霉素
Bianxingqingmeisu
Benzathine Benzylpenicillin
書(shū)頁(yè)號(hào):中國(guó)藥典2005年版二部-227
[修訂]
本品為(2S,5R,6R)-3,3-二甲基-7-氧代- 6-(2-苯乙酰氨基)-4-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚烷-2-甲酸的N,N´-二芐基乙二胺鹽四水合物,或加適量緩沖劑及助懸劑制成的無(wú)菌粉末。按無(wú)水物計(jì)算,含二芐基乙二胺(C16H20N2)應(yīng)為24.0%~27.0%,含青霉素(C16H18N2O4S)應(yīng)為69.9%~75.0%,每1mg含青霉素應(yīng)為1244~1335單位。
【鑒別】 在含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中,供試品溶液兩個(gè)主峰的保留時(shí)間應(yīng)分別與芐星青霉素對(duì)照品溶液中相應(yīng)兩個(gè)主峰的保留時(shí)間一致。
有關(guān)物質(zhì) 精密稱(chēng)取本品約70mg,置50ml量瓶中,加乙腈10ml振搖使均勻分散后,加甲醇10ml充分振搖使溶解,立即用磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀6.8g與磷酸氫二鉀1.14g,加水溶解并稀釋成1000ml)稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液(臨用前現(xiàn)配);精密量取1ml,置100ml量瓶中,用上述磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度,作為對(duì)照溶液。照高效液相色譜法(附錄V D)測(cè)定,用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(端基封尾);流動(dòng)相A為0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.1),流動(dòng)相B為甲醇,流速為每分鐘1.0ml,線性梯度洗脫;柱溫為40℃;檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm。取對(duì)照溶液20μl注入液相色譜儀,調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度,使青霉素峰的峰高約為滿(mǎn)量程的20%,再取供試品溶液及對(duì)照溶液各20μl,注入液相色譜儀,記錄色譜圖。供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰,單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液兩主峰面積之和的2倍(2.0%),各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液兩主峰面積之和的3.5倍(3.5%)。(供試品溶液中任何小于對(duì)照溶液兩主峰面積之和0.05倍的峰可忽略不計(jì))
時(shí)間(分鐘) | 流動(dòng)相A (%) | 流動(dòng)相B (%) |
0
30 55 55.1 70 |
75
35 35 75 75 |
25
65 65 25 25 |
可見(jiàn)異物 取制劑項(xiàng)下的最大規(guī)格量5份,分別加二甲基甲酰胺適量溶解后,依法檢查(附錄IX H),應(yīng)符合規(guī)定。
無(wú)菌 取本品,加入4倍于樣品標(biāo)示單位的無(wú)菌青霉素酶,再加滅菌水制成12萬(wàn)單位/ml混懸液,搖勻,靜置30分鐘后,采用直接接種法,取2 ml,接種于40ml含0.5%聚山梨酯-80培養(yǎng)基中搖勻,培養(yǎng),每日觀察后振搖均勻;以枯草芽孢桿菌為陽(yáng)性對(duì)照菌,依法檢查(附錄Х? H),應(yīng)符合規(guī)定。
【含量測(cè)定】 照高效液相色譜法(附錄Ⅴ D)測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(端基封尾);以0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH值至5.1)-乙腈(83:17)為流動(dòng)相;流速為每分鐘1ml;檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm。理論板數(shù)按青霉素峰和二芐基乙二胺峰計(jì)算均應(yīng)不低于3000。
測(cè)定法 精密稱(chēng)取本品約35mg,置50ml量瓶中,加乙腈10ml振搖使均勻分散后,加甲醇10ml充分振搖使溶解,立即用磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀6.8g與磷酸氫二鉀1.14g,加水溶解并稀釋成1000ml)稀釋至刻度,搖勻,取20μl注入液相色譜儀,記錄色譜圖;另取芐星青霉素對(duì)照品,同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算供試品中青霉素(C16H18N2O4S)和二芐基乙二胺(C16H20N2)的含量。每1mg的C16H18N2O4S相當(dāng)于1780青霉素單位。
【鑒別】 (2)顏色反應(yīng)
【檢查】 二芐基乙二胺,改用HPLC法同時(shí)測(cè)定,方法驗(yàn)證見(jiàn)含量測(cè)定項(xiàng)下