照高效液相色譜法（附錄Ⅵ D）測(cè)定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.4%磷酸 溶液（13：87）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為327nm。理論板數(shù)按綠原酸峰計(jì)算不低于1000。 對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取綠原酸對(duì)照品適量，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成 每1ml含4μg的溶液，即得（10℃以下保存）。

于華忠等采用紫外可見(jiàn)分光光度法測(cè)定杜仲葉中綠原酸含量,其穩(wěn)定性好、重復(fù)性好,回收率為104. 2 %。綠原酸在5. 05~ 40. 4 Lg/ ml之間,其吸光度$A= A325- A345與濃度呈良好線(xiàn)性關(guān)系。此方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、 穩(wěn)定,可用于杜仲葉片綠原酸含量的測(cè)定。

方法名稱(chēng)： 銀翹雙解栓－綠原酸的測(cè)定－高效液相色譜法

應(yīng)用范圍

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定銀翹雙解栓中綠原酸的含量。

本方法適用于中成藥銀翹雙解栓。

方法原理

本品加熱水溶解，搖勻，濾過(guò)，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)324nm處檢測(cè)綠原酸的吸收值，計(jì)算出其含量。

試劑： 1. 甲醇，2. 冰醋酸；

儀器設(shè)備

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按綠原酸峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2色譜條件

2.1流動(dòng)相：甲醇 水 冰醋酸 =15 85 1

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：324nm

2.3柱溫：室溫

試樣制備

1. 稱(chēng)取供試品

取重量差異項(xiàng)下的本品，剪碎，混勻，取約0.5g，精密稱(chēng)定，為供試品。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取綠原酸對(duì)照品適量，置棕色量瓶中，加水制成每1mL含10mg的溶液。

3. 供試品溶液的制備

取重量差異項(xiàng)下的本品，剪碎，混勻，取約0.5g，精密稱(chēng)定，置錐形瓶中，加熱水40mL使溶解，放冷，濾過(guò)，濾液置100mL量瓶中，容器與濾器用熱水洗滌2次（30mL，20mL），洗液并入同一量瓶中.加水至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

操作步驟

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)324nm處測(cè)定綠原酸（C16H18O9）的峰面積，計(jì)算出其含量。