方法名稱：

丁酸氫化可的松原料藥－丁酸氫化可的松－高效液相色譜法

應(yīng)用范圍：

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定丁酸氫化可的松原料藥中丁酸氫化可的松的含量。

本方法適用于丁酸氫化可的松原料藥。

方法原理：

供試品經(jīng)甲醇溶解并定量稀釋，加入內(nèi)標(biāo)后再經(jīng)甲醇定量稀釋，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)240nm處檢測(cè)丁酸氫化可的松的峰面積，計(jì)算出其含量。

試劑：

1. 乙腈

2. 冰醋酸

3. 甲醇

4. 甲睪酮

儀器設(shè)備：

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按丁酸氫化可的松峰計(jì)算應(yīng)不低于1500。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：水 乙腈 冰醋酸=55 45 0.5

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：240nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備：

1. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

精密稱取甲睪酮適量，加甲醇制成每1mL中含0.18mg的溶液，即為內(nèi)標(biāo)溶液。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取丁酸氫化可的松對(duì)照品適量，加甲醇溶解并定量稀釋成每1mL中約含0.26mg的溶液，精密量取該溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各5mL，置50mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即為對(duì)照品溶液。

3. 供試品溶液的制備

精密稱取供試品適量，加甲醇溶解并定量稀釋成每1mL中約含0.26mg的溶液，精密量取該溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各5mL，置50mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

操作步驟：

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)240nm處測(cè)定丁酸氫化可的松（C25H36O6）的峰面積，計(jì)算出其含量。

參考文獻(xiàn)：

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，二部，p.21。