方法名稱： 哌拉西林的測定—高效液相色譜法

應(yīng)用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定哌拉西林（C23H27N5O7S·H2O）的含量。

本方法適用于哌拉西林。

方法原理： 供試品經(jīng)稱取制成流動相溶液，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長254nm處檢測哌拉西林吸收值，計(jì)算出其含量。

試劑：

1. 甲醇

2. 0.2mol/L磷酸二氫鈉溶液

3. 10%氫氧化四乙胺溶液

儀器設(shè)備： 1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按哌拉西林峰計(jì)算應(yīng)不低于 1600。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：甲醇+0.2mol/L磷酸二氫鈉溶液 10%氫氧化四乙胺溶液 水= 400+50 3 547，用磷酸調(diào)pH值至5.5；

2.2 檢測波長：254nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備：

1. 稱取供試品

精密稱取本品試樣40mg。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取哌拉西林對照品適量，加流動相分別制成每1mL含0.02mg的溶液。

3. 供試品溶液的制備

將供試品置于100mL容量瓶中，加適量甲醇溶解后，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各10μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長254nm處測定哌拉西林的吸收值，計(jì)算出其含量。

參考文獻(xiàn)： 中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.391。