方法名稱: 哌拉西林的測定—高效液相色譜法
應(yīng)用范圍: 本方法采用高效液相色譜法測定哌拉西林(C23H27N5O7S·H2O)的含量。
本方法適用于哌拉西林。
方法原理: 供試品經(jīng)稱取制成流動相溶液,進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長254nm處檢測哌拉西林吸收值,計(jì)算出其含量。
試劑:
1. 甲醇
2. 0.2mol/L磷酸二氫鈉溶液
3. 10%氫氧化四乙胺溶液
儀器設(shè)備: 1. 儀器
1.1 高效液相色譜儀
1.2 色譜柱
十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論板數(shù)按哌拉西林峰計(jì)算應(yīng)不低于 1600。
1.3 紫外吸收檢測器
2. 色譜條件
2.1 流動相:甲醇+0.2mol/L磷酸二氫鈉溶液 10%氫氧化四乙胺溶液 水= 400+50 3 547,用磷酸調(diào)pH值至5.5;
2.2 檢測波長:254nm
2.3 柱溫:室溫
試樣制備:
1. 稱取供試品
精密稱取本品試樣40mg。
2. 對照品溶液的制備
精密稱取哌拉西林對照品適量,加流動相分別制成每1mL含0.02mg的溶液。
3. 供試品溶液的制備
將供試品置于100mL容量瓶中,加適量甲醇溶解后,加流動相稀釋至刻度,搖勻,即得供試品溶液。
注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。
操作步驟: 分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各10μL 注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器,于波長254nm處測定哌拉西林的吸收值,計(jì)算出其含量。
參考文獻(xiàn): 中華人民共和國藥典,國家藥典委員會編,化學(xué)工業(yè)出版社,2005年版,二部,p.391。