方法名稱: 健胃消食片- 橙皮苷的測定-高效液相色譜法
應(yīng)用范圍: 本方法采用高效液相色譜法測定健胃消食片中橙皮苷的含量。
本方法適用于中成藥健胃消食片。
方法原理: 本品經(jīng)甲醇加熱回流,放冷,補重,搖勻,濾過,續(xù)濾液進入高效液相色譜儀進行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長283nm處檢測橙皮苷的吸收值,計算出其含量。
試劑: 1. 甲醇
2. 0.5%冰醋酸溶液
儀器設(shè)備: 1 儀器
1.1 高效液相色譜儀
1.2 色譜柱
十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論塔板數(shù)按橙皮苷峰計算應(yīng)不低于2000。
1.3 紫外吸收檢測器
2色譜條件
2.1流動相:甲醇 0.5%冰醋酸溶液=40 60
2.2檢測波長:283nm
2.3柱溫:室溫
試樣制備: 1. 稱取供試品
取本品10片,研細,取約2g,精密稱定,為供試品。
2. 對照品溶液的制備
精密稱取橙皮苷對照品12.5mg,置100mL量瓶中,加甲醇使溶解并稀釋至刻度,搖勻;精密量取3mL,置25mL量瓶中,加50%甲醇稀釋至刻度,搖勻,制成每1mL含橙皮苷15mg的溶液。
3. 供試品溶液的制備
取本品10片,研細,取約2g,精密稱定,精密加入甲醇20mL,稱定重量,置水浴上加熱回流1小時,放冷,再稱定重量,用甲醇補足減失的重量,搖勻,濾過,精密量取續(xù)濾液5mL,置10mL量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,濾過,取續(xù)濾液作為供試品溶液。
操作步驟: 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL,注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器于波長283nm處測定橙皮苷(C28H34O15)的峰面積,計算出其含量。
參考文獻: 中華人民共和國藥典,國家藥典委員會編,化學(xué)工業(yè)出版社,2005版,一部,p567。