方法名稱： 瓦松－槲皮素、山柰素的測(cè)定－高效液相色譜法

應(yīng)用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測(cè)定瓦松中槲皮素、山柰素的含量。

本方法適用于景天科植物瓦松Orostachys fimbriatus (Turcz.) Berg.的干燥地上部分。

方法原理： 本品粉末置具塞錐形瓶中，加甲醇-25%鹽酸溶液（4：1）的混合溶液，水浴回流，冷卻，用甲醇補(bǔ)重，搖勻，濾過(guò)，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)360nm處檢測(cè)槲皮素、山柰素的吸收值，計(jì)算出其含量。

試劑： 1. 甲醇

2. 甲醇-25%鹽酸溶液（4：1）的混合溶液

3. 0.5%磷酸溶液

儀器設(shè)備： 1 儀器

1.1高效液相色譜儀

1.2色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按槲皮素峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2色譜條件

2.1流動(dòng)相：甲醇 0.5%磷酸溶液=47 53

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：360nm

2.3柱溫：室溫

試樣制備： 1. 稱取供試品

精密稱取本品粉末（過(guò)三號(hào)篩）1g, 為供試品。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取槲皮素對(duì)照品、山柰素對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含槲皮素10mg、山柰素20mg的混合溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品粉末（過(guò)三號(hào)篩）約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇-25%鹽酸溶液（4：1）混合溶液50mL，密塞，稱定重量，置水浴中回流1小時(shí)，立即冷卻，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 分別精密吸取對(duì)照品溶液10mL和供試品溶液10~20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)360nm處測(cè)定槲皮素（C15H10O7）和山柰素（C15H10O6）的峰面積，計(jì)算出其含量。

參考文獻(xiàn)： 中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p47。