溶血反應(yīng)檢測是臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)主管技師考試復(fù)習(xí)需要了解的知識，醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)整理相關(guān)知識如下：

（一）補(bǔ)體

檢測血清補(bǔ)體水平或補(bǔ)體活性時(shí)需要從受檢者采血及分離血清。做補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)時(shí)多采用豚鼠血清作為實(shí)驗(yàn)用補(bǔ)體的來源。因?yàn)檠a(bǔ)體在體外極易衰變，所以檢測補(bǔ)體活性的血清標(biāo)本和作為補(bǔ)體試劑的血清必須新鮮。

受檢者一般做靜脈采血，在動物可做心臟采血。血清分離后應(yīng)及時(shí)使用，最好在當(dāng)日用完。必須保存時(shí)采用小量分裝的辦法，置－70℃下可保存數(shù)月，避免反復(fù)凍融。凍干制品可長期保存，但其活性都不同程度地比新鮮血清降低。

以豚鼠血清作補(bǔ)體來源時(shí)，應(yīng)考慮到個(gè)體差異。為了確保血清中補(bǔ)體的有效活性，必須取3只以上豚鼠的血清混合后使用。

（二）綿羊紅細(xì)胞

從綿羊頸靜脈無菌采血，抽出血液后立即小心地注入放有玻璃珠的無菌干燥三角燒瓶中，充分旋搖15～20min，以除去纖維蛋白。也可將羊血與等量或2倍量的Alsever血液保存液混合，既有抗凝作用，又適于儲存；分裝后置4℃，可使用3周。

實(shí)驗(yàn)前，取適量抗凝血，加入8～10倍的生理鹽水，輕輕混勻后2000r/min離心5min；棄上清，沉淀的紅細(xì)胞用生理鹽水再洗一次，這時(shí)上清為無色澄清，如顯紅色說明有溶血現(xiàn)象，應(yīng)更換新鮮羊血；第三次用緩沖液洗滌，棄上清，取壓積紅細(xì)胞用緩沖液配制SRBC懸液，使用濃度一般為2％～5％。為使紅細(xì)胞濃度標(biāo)準(zhǔn)化，可吸取少量紅細(xì)胞懸液，中入20～30倍的稀釋液中，在542nm波長比濁，以吸光度為標(biāo)準(zhǔn)調(diào)整紅細(xì)胞濃度。

（三）溶血素

溶血素即抗綿羊紅細(xì)胞抗體，多是以綿羊紅細(xì)胞免疫家兔而得到兔抗血清。一般沒有必要進(jìn)一步提純抗體，但在試驗(yàn)前需先進(jìn)行加熱56℃30min或60℃3min以滅活補(bǔ)體。

由于補(bǔ)體溶血試驗(yàn)及補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)均是比較精密的試驗(yàn)，其結(jié)果與溶血素的效價(jià)有關(guān)，所以試驗(yàn)需要滴定溶血素效價(jià)；在制備抗血清的過程中，于動物采血前和分離抗血清后也需要滴定溶血素效價(jià)。

（四）稀釋緩沖液

磷酸緩沖液或巴比妥緩沖液等均可用于溶血試驗(yàn)，pH值應(yīng)調(diào)至7.2～7.4之間。另加入適量氯化鈉以保持等滲，并適當(dāng)?shù)丶尤胍恍┾}離子和鎂離子，這是補(bǔ)體活化所不可缺少的。有的配方還加入0.1％的明膠以使蛋白溶液穩(wěn)定；加入0.01％NaN3可以防腐，利于較長時(shí)間保存。