
重組DNA技術形式以及重要的工具酶-?公衛(wèi)執(zhí)業(yè)醫(yī)師復習
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重組DNA技術
【考頻指數(shù)】★★
【考點精講】
1.重組:在接合、轉化、轉導或轉座過程中,不同DNA分子間發(fā)生的共價連接。
(1)接合作用:質(zhì)粒DNA從一個細胞轉移至另一細胞。
(2)轉化作用:將外源DNA分子引入宿主細胞,使細胞或培養(yǎng)的受體細胞獲得新的遺傳表型。
(3)轉導作用:從被感染的細胞(供體)釋放出來的病毒再次感染另一細胞(受體)時,發(fā)生供體細胞與受體細胞之間的DNA轉移。
重要的工具酶:限制性內(nèi)切核酸酶:DNA序列特異的內(nèi)切酶識別特異DNA序列,并在識別位點或其周圍切割雙鏈DNA的一類內(nèi)切酶。
2.基本原理:獲取目的基因→外源基因與載體連接→重組DNA導入宿主細胞→篩選重組體→克隆基因的表達,獲得所需蛋白。
3.醫(yī)學應用:①基因治療,向有功能缺陷的細胞導入具有相應功能的外源基因,以糾正或補償其基因缺陷,從而達到治療目的;②發(fā)展新藥物;③基因(DNA)診斷,利用分子生物學及分子遺傳學的技術和原理,在DNA水平分析、鑒定遺傳性疾病所涉及基因的置換、缺失或插入等突變;④疾病相關基因的發(fā)現(xiàn)。
【進階攻略】基因重組要掌握幾種重組形式以及重要的工具酶,相關醫(yī)學應用要了解。
【知識點隨手練】
一、A1型選擇題
1.基因重組不包括
A.轉化
B.轉換
C.接合
D.轉導
E.轉座
2.有關限制內(nèi)切酶的敘述,正確的是
A.由噬菌體提取而得
B.可將單鏈DNA隨機切開
C.可將雙鏈DNA特異切開
D.可將兩個DNA片段連接起來
E.催化DNA的甲基化
3.可識別并切割DNA分子內(nèi)特異序列的酶稱為
A.限制性外切核酸酶
B.限制性內(nèi)切核酸酶
C.非限制性外切核酸酶
D.非限制性內(nèi)切核酸酶
E.DNA酶
【知識點隨手練參考答案及解析】
一、A1型選擇題
1.【答案及解析】B?;蛑亟M只包括:接合、轉化、轉導或轉座。而基因轉換特指減數(shù)分裂過程中兩條染色體非同源DNA片段的轉移,不屬于基因重組。
2.【答案及解析】C。限制性內(nèi)切酶能分裂DNA分子在一限定數(shù)目的專一部位上。它能識別外源DNA并將其降解。
3.【答案及解析】B。所謂限制性內(nèi)切核酸酶就是識別DNA的特異序列,并在識別位點或其周圍切割雙鏈DNA的一類內(nèi)切酶。通常不用非限制性內(nèi)切核酸酶或非限制性外切核酸酶一詞。DNA酶是一種催化DNA水解的非特異性酶。
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