[生物化學]雙脫氧末端終止法測序體系與PCR反應體系的主要區(qū)別是前者含有:?
選項:
A.模板
B.引物
C.DNA聚合酶
D.ddNTP
E.緩沖液
答案:
D
解析:
答復:本題選D。
一、雙脫氧末端終止法測序體系
用一側引物對PCR產(chǎn)物進行雙脫氧末端終止法測序反應,用一個ddNTP參入反應,產(chǎn)生長短不一的單鏈DNA ,然后進行SSCP分析?煞謩e使用兩側的PCR引物,獲得一端平齊的長度不等的DNA單鏈。DDF方法克服了SSCP分析時因DNA長度影響SSCP顯示的困難,通過一種雙脫氧核苷酸產(chǎn)生異質性的單鏈DNA,使其中長度合適的DNA片段顯示SSCP改變。
二、PCR反應體系
標準的PCR反應體系:
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
PCR反應五要素: 參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+