一、基本原理
紫外--可見分光光度法:是根據物質分子對波長為200-760nm這一范圍的電磁波的吸收特性所建立起來的一種定性、定量和結構分析方法。操作簡單、準確度高、重現性好。波長長(頻率小)的光線能量小,波長短(頻率大)的光線能量大。 100nm、200nm、400nm、800nm、400um、1m通指X-射線、紫外區(qū)、可見區(qū)、紅外區(qū)、微波區(qū)、無線電波區(qū)
Beer-lambert定律: A=Elc
A--吸收度
E-吸收系數
l ---液層厚度
c---溶液濃度吸收度濃度與厚度的關系。是吸收光度法的基本定律,重要前提是單色光。
摩爾吸收系數:指在一定波長下,溶液濃度為1mol/L , 厚度為1cm時的吸收度,用 表示。
百分吸收系數:指在一定波長下,溶液濃度為1%(W/V) , 厚度為1cm時的吸收度,用 表示。
影響B(tài)eer定律因素:化學因素,光學因素
二、紫外--可見分光光度計:
主要部件:
1、 光源:要求光譜的光源,
2、 氫燈和鎢燈(350nm)
3、 單色器:進口狹縫、準直鏡、色散元件(棱鏡和光柵)、聚焦透鏡和出口狹縫組成。
4、 吸收池:用光學玻璃制成的吸收池,
5、 只能用于可見光區(qū)。用熔融石英(氧化硅),
6、 可見紫外光區(qū)。
7、 檢測器:光電池:(硒光電池:用于可見光;硅光電池:紫外可見光) 內阻小,光電管:內阻高,電流易放大 。
8、 易疲勞。
9、 訊號處理和顯示器
三、定性與定量方法:
(一)、定性鑒別:是多數有機化合物具有吸收光譜特征。一般用對比法。
1、對比吸收光譜特征數據
2、對比吸收度(或吸收系數)比值
3、對比吸收光譜的一致性
(二)、純度檢查:雜質檢查與雜質限量檢測
(三)、含量測定:
1、吸收系數法
2、標準曲線法
3、對照法