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原位雜交的特點(diǎn)是雜交在顯微鏡載玻片上中期染色體標(biāo)本上進(jìn)行。所謂原位即指標(biāo)本上DNA原位變性,在利用放射性或非放射性標(biāo)記的已知核酸探針雜交后,通過放射自顯影或非放射性檢測(cè)體系來檢測(cè)染色體上特異DNA或RNA順序,可用放射性顆粒在某條染色體的區(qū)帶出現(xiàn)的最高頻率或熒光的強(qiáng)弱來確定探針的位置,從而進(jìn)行準(zhǔn)確的基因定位。表明用此法將胰島素基因定位于11p15.但原位雜交必須在已知探針的情況下方可進(jìn)行,而在未知致病基因時(shí),則無法進(jìn)行基因定位醫(yī)學(xué)`教育網(wǎng)搜集整理。
放射性同位素標(biāo)記核酸探針與染色體顯帶結(jié)合進(jìn)行原位雜交仍有不少缺點(diǎn)和局限性。例如需要使用放射性同位素的特殊實(shí)驗(yàn)室,自顯影曝光時(shí)間長(zhǎng),同位素標(biāo)記的探針不易保存,放射污染不利健康,特別是高質(zhì)量的中期染色體標(biāo)本在細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)上難以得到,觀察費(fèi)時(shí),對(duì)間期核的研究難以進(jìn)行等。
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