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HIV-抗體確認(rèn)實(shí)驗(yàn)

2011-09-03 15:42 來(lái)源:
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  免疫印跡試驗(yàn)(WB)、條帶免疫試驗(yàn)(LIATEKHIVⅢ)、放射免疫沉淀試驗(yàn)(RIPA)及免疫熒光試驗(yàn)(IFA)。國(guó)內(nèi)常用的確認(rèn)試驗(yàn)方法是WB.

  (一)免疫印跡實(shí)驗(yàn)(WB)

  免疫印跡實(shí)驗(yàn)是廣泛用于許多傳染病診斷的實(shí)驗(yàn)方法,就HIV的病原學(xué)診斷而言,它是首選的用以確認(rèn)HIV抗體的確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方法,WB的檢測(cè)結(jié)果常常被作為鑒別其他檢驗(yàn)方法優(yōu)劣的“金標(biāo)準(zhǔn)”。

  確認(rèn)試驗(yàn)流程:

  有HIV-1/2混合型和單一的HIV-1或HIV-2型。先用HIV-1/2混合型試劑進(jìn)行檢測(cè),如果呈陰性反應(yīng),則報(bào)告HIV抗體陰性;如果呈陽(yáng)性反應(yīng),則報(bào)告HIV-1抗體陽(yáng)性;如果不滿(mǎn)足陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn),則判為HIV抗體檢測(cè)結(jié)果不確定。如果出現(xiàn)HIV-2型的特異性指示條帶,需用HIV-2型免疫印跡試劑再做HIV-2的抗體確認(rèn)試驗(yàn),醫(yī).學(xué)教育網(wǎng)搜集整理呈陰性反應(yīng),報(bào)告HIV-2抗體陰性;呈陽(yáng)性反應(yīng)則報(bào)告HIV-2抗體血清學(xué)陽(yáng)性,并將樣品送國(guó)家參比實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行核酸序列分析, WB的敏感性一般不低于初篩實(shí)驗(yàn),但它的特異性很高,這主要是基于HIV不同抗原組分的分離以及濃縮和純化,能夠檢測(cè)針對(duì)不同抗原成分的抗體,因而能夠用WB方法鑒別初篩實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。從WB確認(rèn)試驗(yàn)結(jié)果看出,初篩試驗(yàn)盡管選擇質(zhì)量較好的試劑,如第三代ELISA,仍會(huì)有假陽(yáng)性出現(xiàn),必須通過(guò)確認(rèn)試驗(yàn)才能得出準(zhǔn)確結(jié)果。

  (二)免疫熒光實(shí)驗(yàn)(IFA)

  IFA法經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便、快速,曾被FDA推薦用于WB不確定樣品的診斷。但需要昂貴的熒光顯微鏡,需要受過(guò)良好訓(xùn)練的技術(shù)人員、觀察和解釋結(jié)果易受主觀因素的影響,結(jié)果不宜長(zhǎng)期保存,IFA不宜在一般的實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展和應(yīng)用。

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