四、瑞斯托霉素誘導(dǎo)的血小板聚集（RIPA）：將瑞斯托霉素加入正常富含血小板血漿中導(dǎo)致血小板聚集。這與血漿vWF和血小板有關(guān)。在vWD約65%患者聚集的量和聚集率降低。測定中應(yīng)注意使用不同濃度的瑞斯托霉素。低濃度瑞斯托霉素時出現(xiàn)高血小板聚集表明vWF的異?；蜓“宓漠惓！?B型vWD和血小板型假vWD患者，0.2～0.7mg/ml瑞斯托霉素濃度可以使其富含血小板血漿聚集，有時在不加瑞斯托霉素情況下可以出現(xiàn)自發(fā)性聚集。正常人富含血小板血漿在此種濃度下不會聚集。1.0～1.2mg/ml為常用的濃度。高于1.2mg/ml常使1型vWD富含血小板血漿的聚集正常。醫(yī).學(xué)教育網(wǎng)搜集整理

　　五、vWF瑞斯托霉素輔因子活性（vWF：Ricof） 定量測定血漿 vWF在瑞斯托霉素存在時使血小板聚集的能力。使用正常洗滌無vWF血小板或福爾馬林固定血小板。正常人血漿vWF：Ricof為50%～150%.本法結(jié)果與RIPA意義相同但比RIPA更敏感，特異性重復(fù)性更高。在1型vWD一般降低，也可正常。2A型和2M型顯著降低，2N型正常，2B型升高，3型極低。

　　Botrocetin是一種蝰蛇毒，在vWF存在時可使血小板聚集，也可代替瑞斯托霉素用于測定vWF輔因子的活性。但在缺少大分子量vWF多聚體的2型vWD，所測得的vWF輔因子活性高于用瑞斯托霉素。

　　六、瓊脂糖凝膠電泳多聚體分析：血漿vWF和血小板vWF，在SDS瓊脂糖凝膠電泳時vWF多聚體在分子量大小的基礎(chǔ)上分離，大分子量多聚體移動最慢，中分子量多聚體較快，小分子量多聚體最快。多聚體可用放射自顯影或酶標(biāo)技術(shù)顯示。在收集標(biāo)本和實驗過程中應(yīng)注意加入蛋白酶抑制劑。正常多聚體圖形大、中、小分子量多聚體均存在，可觀察到1條主帶和2條或4條衛(wèi)星帶。血小板中可有比血漿更大分子量多聚體成分。多聚體分析在vWF分型中起著重要作用。1型vWD大、中、小分子量多聚體均存在，自顯影比正常對照淺，示vWF量均勻減少。3型無多聚體出現(xiàn)。2型vWD多聚體圖形異常變化多，可表現(xiàn)為大、中分子量多聚體缺如，衛(wèi)星帶消失等多種異常類型，是以前Ⅱ型亞型分類的重要依據(jù)。