交叉配血法最重要的是ABO血型配合。必須在ABO血型相同,且交叉配血無凝集時才能輸血。
1.目的:檢查受血者與供血者是否存在血型抗原與抗體不合的情況。
2.原則:主側(cè)加受血者血清與供血者紅細胞;次側(cè)加受血者紅細胞與供血者血清,觀察兩者是否出現(xiàn)凝集。
3.方法
(1)鹽水配血法:簡便快速。主要缺點是只能檢出不相配合的完全抗體,而不能檢出不完全抗體。
(2)抗球蛋白法配血法:又稱Coombs試驗。是最可靠的確定不完全抗體的方法,但操作繁瑣。抗球蛋白法配血法是最早用于檢查不完全抗體的方法。
直接抗球蛋白法可檢查受檢者紅細胞是否已被不完全抗體致敏;間接抗球蛋白法可用于鑒定Rh血型及血清中是否存在不完全抗體。本法雖較靈敏,但也有一定限度,且操作復雜,不利于急診檢查和血庫的大批量工作。
試劑:抗球蛋白試劑盒:包括抗廣譜、抗C3、抗IgG3種試劑。陽性對照:IgG型抗D致敏5%RhD陽性紅細胞生理鹽水懸液。陰性對照:正常人5%紅細胞生理鹽水懸液。
注意事項:①標本采集后應立即進行試驗,延遲試驗或中途停止可使抗體從細胞上丟失。②抗人球蛋白血清應按說明書最適稀釋度使用,否則可產(chǎn)生前帶或后帶現(xiàn)象而誤為陰性結(jié)果。③陰性對照凝集:可能是抗人球蛋白血清處理不當,仍有殘存的種屬抗體,或被細菌污染,應更換血清重做試驗。核實陰性結(jié)果方法:在該試管中加1滴IgG致敏紅細胞,如結(jié)果為陽性,則表示試管內(nèi)的抗球蛋白血清未被消耗,陰性結(jié)果可靠。④陽性對照不凝集:可能是抗人球蛋白血清或用于致敏紅細胞的不完全抗D血清失效,或紅細胞未洗凈帶人球蛋白所致,應更換血清或洗凈紅細胞后重做。⑤如需了解體內(nèi)致敏紅細胞的免疫球蛋白的類型,則可分別以抗IgG、抗IgM或抗C3單價抗球蛋白血清進行試驗。
?。?)聚凝胺法配血法:可以檢出IgM與IgG兩種性質(zhì)的抗體,能發(fā)現(xiàn)可引起溶血性輸血反應的幾乎所有規(guī)則與不規(guī)則抗體,故本法已逐漸推廣使用。配血原理:聚凝膠分子是帶有高價陽離子多聚季鍍鹽,醫(yī)學教育網(wǎng)收集整理溶解后帶有很多正電荷可以中和紅細胞表面負電荷,有利于紅細胞凝集,低離子強度溶液也能減低紅細胞的Zeta電位,可進一步增加抗原抗體間的吸引力。當血清中存在IgM或IgG類血型抗體時,與紅細胞發(fā)生緊密結(jié)合,此時加入枸櫞酸鹽解聚液以消除聚凝膠的正電荷,使IgM或IgG類血型抗體與紅細胞產(chǎn)生凝集不會散開。如血清中不存在IgM或IgG類血型抗體,加入解聚液可使非特異性凝集消失。
?。?)凝膠配血法:又稱微管(板)凝膠抗球蛋白試驗,此法在凝膠中進行,保持了傳統(tǒng)抗球蛋白試驗的準確、具有簡便、可靠的特點,全自動血型分析儀進行交叉配血,也是利用凝膠配血。
其他可檢出不完全抗體的方法有蛋白酶法、膠體介質(zhì)法等。
卡式配血/血型鑒定檢測法已成為國際安全輸血檢查的推薦方法。
4.質(zhì)量控制
?。?)血液標本:交叉配血的血液標本,醫(yī)學教育網(wǎng)收集整理受血者標本應為新鮮血,供血者標本應為血袋兩端剛剪下小管中的血液。
(2)選用方法:用試管法做交叉配血。
?。?)溶血現(xiàn)象:配血管出現(xiàn)溶血現(xiàn)象,為配血不合。