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2012-12-13 20:08 醫(yī)學教育網
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方法名稱: ?;撬岬窝垡海;撬幔咝б合嗌V法

應用范圍: 本方法采用高效液相色譜法測定?;撬岬窝垡褐信;撬岬暮俊?/p>

本方法適用于?;撬岬窝垡骸?/p>

方法原理: 供試品加水稀釋后,取適量依次加入碳酸氫鈉溶液(pH9.0)及1%2,4-二硝基氟苯乙腈溶液,置60℃水浴中加熱1小時后取出,冷至室溫,加磷酸鹽緩沖液(pH7.0)稀釋,進入高效液相色譜儀進行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長360nm處檢測牛磺酸的峰面積,計算出其含量。

試劑: 1. 乙腈

2. 磷酸鹽緩沖液(pH7.0)

3. 0.1mol/L氫氧化鈉溶液

4. 0.5mol/L碳酸氫鈉溶液(pH9.0)

5. 1%2,4-二硝基氟苯乙腈溶液

儀器設備: 1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論塔板數按?;撬嵫苌锓逵嬎銘坏陀?500。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相:磷酸鹽緩沖液(pH7.0) 乙腈 水=70 15 15

2.2 檢測波長:360nm

2.3 柱溫:室溫

試樣制備: 1. 磷酸鹽緩沖液(pH7.0)

取磷酸二氫鉀0.68g,加0.1mol/L氫氧化鈉溶液29.1mL,用水稀釋至100mL。

2. 0.1mol/L氫氧化鈉溶液

取氫氧化鈉適量,加水振搖使溶解成飽和溶液,冷卻后,置聚乙烯塑料瓶中,靜置數日,澄清后備用。取澄清的氫氧化鈉飽和溶液5.6mL,加新沸過的冷水使成1000mL,搖勻。

3.稱取供試品

精密量取供試品3mL為供試品。

4. 對照品溶液的制備

精密稱取?;撬釋φ掌愤m量,加水制成每1mL約含1.5mg的溶液,即為對照品溶液。

5. 供試品溶液的制備

取供試品置100mL量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,精密量取1mL,置10mL量瓶中,依次加入0.5mol/L碳酸氫鈉溶液(pH9.0)1mL,1%2,4-二硝基氟苯乙腈溶液0.5mL,搖勻,置60℃水浴中加熱1小時后取出,冷至室溫,加磷酸鹽緩沖液(pH7.0)稀釋至刻度,搖勻,即為供試品溶液。

注:“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟: 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10mL,注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器于波長360nm處測定牛磺酸(C30H48O3)的峰面積,計算出其含量。

參考文獻: 中華人民共和國藥典,國家藥典委員會編,化學工業(yè)出版社,2005版,一部,p.51。

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