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肺炎鏈球菌細菌的實驗室檢查

2012-09-12 21:01 醫(yī)學教育網(wǎng)
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標本采集

包括痰、膿液、血液、腦脊液等標本。

涂片染色鏡檢

革蘭氏色染色呈陽性球菌,呈矛頭狀成雙排列,坦面相鄰,尖端向外。若標本可見大量炎性細胞同時存在時有重要的參考價值。

莢膜染色

陽性。

分離培養(yǎng)

常采用羊血平板,有助于其溶血特征的識別和進一步鑒定,而且初代分離應置5%~10%CO2的環(huán)境下培養(yǎng)。在血平板上,肺炎鏈球菌的菌落直徑0.5~1.5mm,灰白色、半透明、表面光滑(有些菌株可表現(xiàn)為粘液狀)扁平,周圍環(huán)繞著草綠色溶血環(huán)。培養(yǎng)或放置24h以上的培養(yǎng)物還會由于肺炎鏈球菌的自溶作用而致菌落中央塌陷而邊緣隆起,而呈臍窩狀。

鑒定試驗

① 膽汁溶菌試驗:本試驗的原理基于膽鹽能夠通過活化肺炎鏈球奧普托欣(Optochin)試驗菌的自溶酶而溶解肺炎鏈球菌,但不能溶解草綠色鏈球菌。常用的方法包括快速平板法和標準試管法。前者取一接種環(huán)2%去氧膽酸鈉溶液加于血平板待鑒定菌的菌落上,置35℃孵育15~30min,菌落溶解消失為陽性。而后者則是在1ml待鑒定菌18~24h培養(yǎng)液中加入2滴10%去氧膽酸鈉溶液,35℃孵育5-10min后鑒定菌管由混濁變?yōu)橥该髡邽殛栃浴?/p>

② 奧普托欣(Optochin)試驗:用以與其他草綠色鏈球菌相鑒別。用接種環(huán)將單個待鑒定菌落均勻涂于血平板上,用含量為5μg的optochin紙片貼于接種區(qū)中央,35℃需氧培養(yǎng)過夜,抑菌圈 >18mm的為陽性。本菌為陽性。

小鼠毒力試驗

若用有毒力的菌株接種小鼠,接種后12-36h,小鼠死亡。

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