血清總蛋白測(cè)定原理:
1.雙縮脲法
蛋白質(zhì)中的肽鍵在堿性溶液中能與銅離子作用產(chǎn)生紫紅色絡(luò)合物。此反應(yīng)和兩個(gè)尿素分子縮合后生成的雙縮脲在堿性溶液中與銅離子作用形成的紫紅色的反應(yīng)相似,故稱(chēng)之為雙縮脲反應(yīng)。這種顏色反應(yīng)強(qiáng)度在一定濃度范圍內(nèi)與蛋白質(zhì)含量成正比,經(jīng)與同樣處理的蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)液比較,即可求得蛋白質(zhì)含量。
2.微量凱氏定氮波氏顯色法
血清中蛋白質(zhì)及非蛋白含氮化合物經(jīng)硫酸作用后變成銨,后者用酚-次氯酸鹽試劑顯色后測(cè)定總氮??偟獪p去非蛋白氮,最后換算成蛋白含量。
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