制備單克隆抗體（單抗）的主要方法是雜交瘤技術(shù)。這項(xiàng)技術(shù)是由Kohler和Milstein在1975年發(fā)明的，他們也因此獲得了諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。該過程主要包括以下幾個(gè)步驟：

首先，選擇合適的動(dòng)物（通常是小鼠），用目標(biāo)抗原進(jìn)行免疫接種，激發(fā)體內(nèi)產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞。

然后，從免疫后的小鼠脾臟中提取這些已激活的B淋巴細(xì)胞，并與骨髓瘤細(xì)胞融合，形成雜交瘤細(xì)胞。這種骨髓瘤細(xì)胞具有無限增殖的能力。

接下來，在特定的選擇性培養(yǎng)基（如HAT選擇培養(yǎng)基）上篩選出能夠生存并分泌所需單抗的雜交瘤細(xì)胞。只有成功融合了的細(xì)胞才能在這種特殊環(huán)境下存活下來。

之后，通過有限稀釋法或其他方法對(duì)陽性克隆進(jìn)行亞克隆化處理，以確保每個(gè)孔中只有一個(gè)細(xì)胞生長，從而保證獲得均一的抗體來源。

最后，將篩選得到的優(yōu)質(zhì)雜交瘤細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)，并收集上清液或腹水中產(chǎn)生的單抗用于后續(xù)研究和應(yīng)用。此外，還可以通過基因工程方法改造雜交瘤細(xì)胞，提高其穩(wěn)定性和產(chǎn)量，或者直接在哺乳動(dòng)物細(xì)胞系中表達(dá)重組形式的人源化或全人源單抗。

以上就是制備單克隆抗體的主要步驟。隨著生物技術(shù)的發(fā)展，現(xiàn)在還有其他一些新的方法用于單抗的生產(chǎn)，比如噬菌體展示技術(shù)和轉(zhuǎn)基因小鼠技術(shù)等。