生物素在免疫標(biāo)記技術(shù)中扮演著重要角色，主要通過(guò)其與親和素或鏈霉親和素之間極高的結(jié)合特異性來(lái)實(shí)現(xiàn)。這種高親和力使得生物素-親和素系統(tǒng)成為一種非常有效的工具，在多種免疫檢測(cè)方法中得到廣泛應(yīng)用。
1. 生物素化抗體：首先將生物素共價(jià)連接到特定的單克隆或多克隆抗體上，形成生物素化的探針。這個(gè)過(guò)程可以通過(guò)化學(xué)反應(yīng)實(shí)現(xiàn)，如使用NHS酯或光敏生物素等活化形式的生物素與抗體上的氨基或其他功能基團(tuán)結(jié)合。
2. 結(jié)合目標(biāo)抗原：將上述制備好的生物素化抗體加入到含有待測(cè)樣本（例如血清、組織切片）中，讓其與目標(biāo)抗原發(fā)生特異性免疫反應(yīng)形成復(fù)合物。
3. 親和素/鏈霉親和素標(biāo)記的酶或熒光染料：向體系中添加預(yù)先制備好的親和素或鏈霉親和素-酶（如辣根過(guò)氧化物酶、堿性磷酸酶）或者熒光素偶聯(lián)物。由于生物素與親和素之間存在極高的親和力，因此可以迅速而穩(wěn)定地形成“抗原-抗體-生物素-親和素/鏈霉親和素-標(biāo)記物”復(fù)合體。
4. 顯色或發(fā)光檢測(cè)：最后通過(guò)添加底物溶液（對(duì)于酶標(biāo)系統(tǒng)）或者使用熒光顯微鏡觀察（對(duì)于熒光標(biāo)記系統(tǒng)），根據(jù)產(chǎn)生的顏色變化或熒光信號(hào)強(qiáng)度來(lái)判斷目標(biāo)抗原的存在與否及其含量水平。

該技術(shù)不僅提高了檢測(cè)的靈敏度和特異性，還簡(jiǎn)化了操作步驟，減少了背景干擾，在臨床診斷、科學(xué)研究等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。