生化檢測(cè)中,比色法的原理是什么?
在生化檢測(cè)中,比色法是一種常用的定量分析方法。其基本原理是基于溶液顏色與濃度之間的關(guān)系,即朗伯-比爾定律(Lambert-Beer Law)。當(dāng)一束單色光通過有色溶液時(shí),部分光線會(huì)被溶液中的特定物質(zhì)吸收,而透射光的強(qiáng)度會(huì)隨著溶液中該物質(zhì)濃度的增加而減弱。這種關(guān)系可以用以下公式表示:A = εbc
其中,A代表吸光度(Absorbance),ε是摩爾吸光系數(shù),b是比色皿的厚度,c則是待測(cè)物質(zhì)的濃度。
在實(shí)際操作中,我們首先需要制備一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,并測(cè)量它們?cè)谔囟úㄩL(zhǎng)下的吸光值。然后根據(jù)這些數(shù)據(jù)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。接下來(lái),將未知樣品與顯色劑反應(yīng)后,在相同條件下測(cè)定其吸光度。最后通過比較或查找標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)確定樣品中的目標(biāo)物質(zhì)濃度。
比色法操作簡(jiǎn)便、成本低廉且靈敏度較高,適用于多種生化指標(biāo)的檢測(cè),如血糖、血脂等。
其中,A代表吸光度(Absorbance),ε是摩爾吸光系數(shù),b是比色皿的厚度,c則是待測(cè)物質(zhì)的濃度。
在實(shí)際操作中,我們首先需要制備一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,并測(cè)量它們?cè)谔囟úㄩL(zhǎng)下的吸光值。然后根據(jù)這些數(shù)據(jù)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。接下來(lái),將未知樣品與顯色劑反應(yīng)后,在相同條件下測(cè)定其吸光度。最后通過比較或查找標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)確定樣品中的目標(biāo)物質(zhì)濃度。
比色法操作簡(jiǎn)便、成本低廉且靈敏度較高,適用于多種生化指標(biāo)的檢測(cè),如血糖、血脂等。
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