斑點(diǎn)金免疫滲濾試驗(yàn)的原理是什么?
斑點(diǎn)金免疫滲濾試驗(yàn)(Dot Gold Immunofiltration Assay, DGIFA)是一種快速、簡(jiǎn)便的定性檢測(cè)方法,主要用于檢測(cè)樣本中特定抗原或抗體的存在。其工作原理基于金標(biāo)技術(shù),即利用膠體金顆粒作為標(biāo)記物與待測(cè)物質(zhì)結(jié)合。
具體步驟如下:
首先,在硝酸纖維素膜上預(yù)先固定已知抗體(或抗原)。當(dāng)加入含有目標(biāo)抗原的樣品時(shí),若樣品中存在該抗原則會(huì)與膜上的特異性抗體發(fā)生免疫反應(yīng)形成復(fù)合物。隨后,添加膠體金標(biāo)記的二抗,它能夠識(shí)別并結(jié)合到上述形成的抗原-一抗復(fù)合物上。
由于膠體金顆粒具有明顯的紅色特性,在光照下容易觀察到顏色變化。如果樣本中含有待測(cè)物質(zhì),則會(huì)在膜上的特定位置出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的紅色斑點(diǎn);反之則無(wú)明顯色變,表明檢測(cè)結(jié)果為陰性。
該方法操作簡(jiǎn)單、快速且無(wú)需特殊設(shè)備支持,適用于現(xiàn)場(chǎng)篩查或初步診斷等多種場(chǎng)合。但需要注意的是,DGIFA主要用于定性分析,并不能提供精確的定量信息。
具體步驟如下:
首先,在硝酸纖維素膜上預(yù)先固定已知抗體(或抗原)。當(dāng)加入含有目標(biāo)抗原的樣品時(shí),若樣品中存在該抗原則會(huì)與膜上的特異性抗體發(fā)生免疫反應(yīng)形成復(fù)合物。隨后,添加膠體金標(biāo)記的二抗,它能夠識(shí)別并結(jié)合到上述形成的抗原-一抗復(fù)合物上。
由于膠體金顆粒具有明顯的紅色特性,在光照下容易觀察到顏色變化。如果樣本中含有待測(cè)物質(zhì),則會(huì)在膜上的特定位置出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的紅色斑點(diǎn);反之則無(wú)明顯色變,表明檢測(cè)結(jié)果為陰性。
該方法操作簡(jiǎn)單、快速且無(wú)需特殊設(shè)備支持,適用于現(xiàn)場(chǎng)篩查或初步診斷等多種場(chǎng)合。但需要注意的是,DGIFA主要用于定性分析,并不能提供精確的定量信息。
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