雜交瘤技術(shù)是制備單克隆抗體的重要方法，其基本原理是將能夠產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞與具有無限增殖能力的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，形成既能分泌特定抗體又可以持續(xù)分裂的雜交細(xì)胞。這個(gè)過程主要包括以下幾個(gè)步驟：
1. 免疫動(dòng)物：首先選擇合適的動(dòng)物（如小鼠）注射抗原物質(zhì)，使動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生針對(duì)該抗原的特異性B淋巴細(xì)胞。
2. 細(xì)胞融合：從免疫后的動(dòng)物脾臟中獲取含有特異性抗體生成能力的B淋巴細(xì)胞，并與骨髓瘤細(xì)胞混合，在聚乙二醇(PEG)等化學(xué)誘導(dǎo)劑的作用下促使兩種細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞。
3. 篩選和克隆化：將融合后的細(xì)胞培養(yǎng)在選擇性培養(yǎng)基（如HAT培養(yǎng)基）中，其中只有成功融合的雜交瘤細(xì)胞能夠存活并增殖。然后通過有限稀釋法或其他方法進(jìn)行單個(gè)細(xì)胞的克隆化擴(kuò)增，以確保每個(gè)克隆都來源于單一的雜交瘤細(xì)胞。
4. 抗體檢測(cè)：對(duì)各個(gè)克隆產(chǎn)生的抗體進(jìn)行特異性、親和力等方面的測(cè)試，篩選出最優(yōu)秀的雜交瘤細(xì)胞系。
5. 擴(kuò)大培養(yǎng)與純化：將選定的優(yōu)質(zhì)雜交瘤細(xì)胞株在大規(guī)模條件下進(jìn)行無血清或低血清條件下的懸浮培養(yǎng)，收集上清液并采用親和層析等技術(shù)從其中分離純化單克隆抗體。

通過上述步驟，可以得到高純度、高度特異性的單克隆抗體。這些抗體廣泛應(yīng)用于科研、診斷試劑盒開發(fā)以及治療性藥物等領(lǐng)域。