雜交瘤技術(shù)的核心步驟主要包括以下幾個(gè)方面：
1. 免疫動(dòng)物：選擇適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)動(dòng)物（如小鼠），通過(guò)注射特定抗原使動(dòng)物產(chǎn)生免疫反應(yīng)，從而在體內(nèi)形成能夠識(shí)別該抗原的B淋巴細(xì)胞。
2. 融合細(xì)胞：將上述免疫后的脾臟中提取出的B淋巴細(xì)胞與一種可以無(wú)限增殖但自身不能分泌抗體的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合。通常使用聚乙二醇（PEG）作為促融劑來(lái)促進(jìn)兩種細(xì)胞之間的融合過(guò)程，形成雜交瘤細(xì)胞。
3. 篩選克?。簩⑷诤虾蟮幕旌霞?xì)胞接種到選擇性培養(yǎng)基中，只有成功融合形成的雜交瘤細(xì)胞才能生存并增殖。通過(guò)有限稀釋法或其他方法篩選出能夠穩(wěn)定分泌所需單克隆抗體的單一細(xì)胞系（即克?。?。
4. 擴(kuò)增與純化：對(duì)篩選出來(lái)的陽(yáng)性克隆進(jìn)行擴(kuò)增，并采用適當(dāng)?shù)姆椒◤呐囵B(yǎng)上清或小鼠腹水中提取和純化目標(biāo)單抗。
5. 鑒定與應(yīng)用：最后，需要對(duì)抗體的特異性、親和力等性質(zhì)進(jìn)行全面鑒定，確保其符合預(yù)期要求后方可用于科研或臨床檢測(cè)等領(lǐng)域。